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1、PS（磷脂酰絲氨酸）在胞外膜分布的檢測PS從胞膜內側轉移到外側現象是在細胞凋亡的早期即可發生標志。AnnexinV是一種鈣依賴性的磷脂結合蛋白，能專一性的結合暴露在胞膜外側的PS，使用熒光素標記的AnnexinV蛋白（如AnnexinV-FITC）即可檢測細胞凋亡。由于這是一種凋亡早期的活細胞檢測（懸浮細胞和貼壁細胞都適用），可與DNA染料或別的晚期檢測方法相結合來標記凋亡的發展階段。操作簡便快速，10分鐘就可完成檢測。靈敏度高，可作為流式方法分析凋亡細胞的基礎。2、細胞內氧化還原狀態改變的
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微生物菌種冷凍干燥和液氮保藏菌種技術－、安瓶管開封1．用浸過70％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。2．用火焰將安瓿管頂端加熱。3．滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。4．用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。二、菌株恢復培養1．用無菌吸管，吸取0.3～0.5ml適宜的液體培養基，滴人安瓿管內，輕輕振蕩，使凍于菌體溶解呈懸浮狀。2．取0.1～0.2ml菌體懸浮液，移植于適宜的瓊脂斜面／平板培養基上，剩余的菌液，注入適宜的液體培養基內，然后在建議的溫度下培養。3．若未能活化，或活化后有疑問時，請于收到菌種
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上皮細胞的培養方法上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別受到重視.但上皮細胞培養中常混雜有成纖維細胞,培養時生長速度往往超過上皮細胞,并難以純化,同時上皮細胞難以在體外長期生存,因此純化和延長生存時間是培養關鍵.體內上皮細胞生長在膠原構成的基膜,因此培養在有膠原的底物上可能利于生長,另外人或小鼠表皮細胞培養在以3T3細胞為飼養層（用射線照射后）時,細胞易生長并可發生一定程度的分化現象.降低PH、Ca2+含量和溫度,向培養基中加入表皮生長
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細胞的純化的兩種方法細胞的純化一般分為兩種,即自然純化很人工純化.常用的純化方法有,酶消化法,細胞因子依賴純化法,機械刮除法,反復貼壁法,電烙篩選法.體外培養的細胞源于人或動物或胚胎組織,體內的細胞都是混雜生長,每一種組織都有血管和間葉組織,因此,來源于上述組織的培養材料的原代細胞、傳代細胞絕大多數都呈混合生長,既有上皮樣細胞又有纖維樣細胞,纖維樣細胞又包括成纖維細胞、肌細胞、骨細胞、滑膜細胞等,混雜的細胞會直接影響實驗結果,而利用體外培養細胞進行實驗研究時,為了保證實驗結果的可靠性、一致性、穩
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T淋巴細胞轉化實驗的基本原理T細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化.淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一.T細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化.淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一.淋巴細胞轉化試驗
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細胞的復蘇及凍存方法一.細胞復蘇與培養將液氮或-80℃保存的腫瘤細胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養基混勻已融化的腫瘤細胞懸液，于1500轉/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養基質混勻細胞沉淀，再1500轉/分，離心3分鐘，棄上清，細胞沉淀用1.0ml培養基混勻，備用。另取一個75cm2方瓶，加入14.0ml培養基質，將上述制備的含腫瘤細胞懸液(1.0ml)加入此方瓶中，于37℃，5%CO2孵育箱中培養。若此腫瘤細胞懸浮生長，大約3－4天細胞基質會變黃，5.0ml細胞懸液可傳代
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影響細胞生長的幾點因素，摘要：細胞在體外進行培養,失去了機體的調節和控制,因此,除滿足營養的要求外,還必須使細胞生存環境晝接近活體的環境.外環境的培養條件如溫度、滲透壓、酸堿度等均能影響細胞的生長.一、溫度：一般哺乳類及禽類細胞體外培養的適宜溫度是37~38℃.溫度過高或過低都會影響到細胞的生長.細胞耐受低溫的能力比抗熱的能力強,在低溫下,細胞的代謝活力及核分裂降低.溫度低于0℃時,雖影響細胞代謝,但并無傷害作用.把細胞置于23~25℃時,細胞仍能生存和生長,但速度減緩,不過,魚類細胞的適宜培養
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1冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。2細胞冷凍管解凍培養時，是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對DMSO敏感之細胞外，絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞)，在解凍之后，應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中，待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。3可否使用與
