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總膽固醇檢測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù)的意義:
總膽固醇是指血清中各種脂蛋白所含的膽固醇,即結(jié)合膽固醇和游離膽固醇的總和。由于血清中的膽固醇基本上是以結(jié)合狀態(tài)存在于脂蛋白中,所以它主要代表結(jié)合的膽固醇。由于它不能夠反映各種脂蛋白的多少,所以它也就不能夠確切地反映高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇的多少,因此也就不能單獨(dú)作為判斷動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)性大小的準(zhǔn)確指標(biāo)。
總膽固醇檢測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù)的樣本處理:
①、血清(漿):直接測(cè)定,如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測(cè)定。
②、培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,2500轉(zhuǎn)/分, 離心10分鐘,取上清測(cè)定。
③、組織樣本:準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量():體積(m)=1:9的比例,加入9倍體積的勻漿介質(zhì),冰水浴條件下機(jī)械勻漿,2500轉(zhuǎn)1分, 離心10分鐘,取上清液待測(cè)。
④.細(xì)胞樣本:
A.細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出,1000 轉(zhuǎn)1分,離心10 分鐘,棄上清液,留細(xì)胞沉淀;用等滲緩沖液(*0.1mol/L、pH7~74磷酸鹽緩沖液)清洗1~2次,同樣1000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,棄上清液,留細(xì)胞沉淀;
B、細(xì)胞破碎:加入0.2~0.3ml的勻漿介質(zhì)(*0.1mo/L、pH7~7.4磋酸鹽緩沖液或生理鹽水)進(jìn)行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率300W, 3~5秒/次,間隔30秒,重復(fù)3~5次)或手動(dòng)勻漿,制備好的勻漿液不離心待測(cè)。也可采用裂解液裂解(*TritonX- 100,1~2%,裂解30~40分鐘),裂解好的液體不離心直接測(cè)定。
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