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腦損傷動物模型構建實驗方法：

(1)復制方法 健康雄性大鼠，體重為230～260g。對于腦損傷動物模型構建實驗采用改進的Feeney自由落體硬膜外撞擊方法。損傷裝置由底板、固定支架、垂直導桿、下落擊錘和聚乙烯撞擊圓錐組成。撞擊圓錐頭端直徑為4mm、高為2.5mm。經腹腔注射水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)麻醉。將其頭部固定于立體定向儀上，剪去頂部毛發，手術區域皮膚消毒。沿中線左側切開頭皮，分離骨膜，用牙科鉆于中線旁2mm、緊挨冠狀縫后開一直徑5mm的圓形窗，硬膜保持完整。用20g砝碼于10cm和30cm高處通過一金屬導桿墜落，撞擊置于硬膜上的圓錐上致輕、中型損傷，另用40g砝碼于25cm高處墜落致重型損傷。輕、中、重三型損傷的致傷沖擊力分別為200g·cm、600g·cm和1000g·cm，用鋅汀粉封閉骨窗，縫合頭皮，置鼠籠喂養。

(2)檢測指標1)腦含水量測定 動物斷頭處死后，30s內取出大腦，用濾紙吸盡腦表面血液后，銳性分離左側頂葉皮質約100mg，用電子分析天平稱濕重后，置于110℃恒溫干燥箱內烤干(24h)，稱干重。用Elliot公式計算各部位腦含水量百分率：腦含水量(％)＝[(濕重－干重)/濕重]×100％2)血腦屏障定量測定 動物于損傷前1h注射2％伊文斯藍(3ml/kg體重)。在取腦組織前，為清除血液中染料，可用生理鹽水經左心室灌注至右心室流出清亮液體為止。取損傷側皮質分別稱重，加入二倍體積的二甲基甲酰胺，50℃水浴中孵育72h，1500g離心，離心10min，取上清液。應用分光光度計在伊文斯藍大吸收光譜635mm處檢測吸光度，從標準曲線上查得伊文斯藍含量，結果以μg/g腦組織表示。

3)病理學觀察 損傷后24h再次麻醉，經升主動脈快速灌注生理鹽水150ml，繼之快速灌注冰冷的4％多聚甲醛200ml，隨后再用其300ml在2h內慢速灌注，取腦組織浸入4％多聚甲醛內4℃后固定48h，常規乙醇脫水，石蠟包埋，行5μm冠狀切片，作HE染色及尼氏小體染色，光鏡下觀察。若采用透射電鏡觀察者，灌注液為4％多聚甲醛和2％戊二醛/0.1MPB(pH7.4)，隨后浸入2％戊二醛/0.1MPB(pH7.4)內，4℃固定過夜。常規脫水，環氧樹脂包埋，超薄切片，醋酸鉛鈾染色，透射電鏡觀察。