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伊萊博生物科技（上海）有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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動(dòng)物小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞的種植

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更新時(shí)間：2024-01-24 13:33:11瀏覽次數(shù)：342次

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動(dòng)物小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞的種植：在無菌的條件下分離并取出小鼠的脛骨和股骨，注意不要打破骨頭。隨后放入含有75%酒精的細(xì)胞培養(yǎng)皿中。

動(dòng)物小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞的種植所用動(dòng)物

 C57小鼠，雌性， 10周， 通過頸椎脫臼處死小鼠，浸入75%乙醇浸泡5分鐘，轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。

 

動(dòng)物小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞的種植方法

打開皮膚，暴露、收集股骨，無菌狀態(tài)下移除附著的肌肉和組織。

 

 轉(zhuǎn)移股骨至預(yù)冷含雙抗的PBS中浸泡，洗滌三次，冰上操作。

 

切斷股骨骨骺，使用3ml 種植液，1ml注射器沖洗，沖洗液由棕色變成粉紅色即可。

 

收集沖洗液，計(jì)數(shù)。 


 用種植液（DMEM+10%FBS+20%L929細(xì)胞上清液+1%雙抗）稀釋細(xì)胞， 種在3個(gè)10cm皿中，37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

 

培養(yǎng)6天的巨噬細(xì)胞。


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