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堿性磷酸酶染色檢測技術(shù)

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更新時間:2023-10-30 16:27:49瀏覽次數(shù):530次

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堿性磷酸酶染色檢測技術(shù)原理:
在一定條件下,使細(xì)胞中的酶作用于酶的底物,使其產(chǎn)物在原地進(jìn)行 捕捉、沉淀轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物,細(xì)胞組織中的堿性磷酸酶在堿性(PH9.0-9.6)環(huán)境下使作用液中的底物(a-磷酸萘酚鈉)水解,產(chǎn)生出a萘酚,然后再與 偶氨鹽偶聯(lián),生成不溶性的耐曬染料

實(shí)驗操作流程:

1、取材、 固定、包埋、切片;

2、取已粘好烘 干的切片兩塊,放入二甲苯(一)→二甲苯(二)(各3-4分鐘)的染缸中進(jìn)行脫蠟,再經(jīng)100%乙醇(一)

→100%<醇(二)→95%乙醇→90%乙醇 →70%醇→30%乙醇→水。每級各一分鐘,在移切片時,用鑷子夾住切片震蕩

并提起,放下反復(fù)幾次,在移入下一染缸邊緣前稍停留,讓溶液滴凈后,再入下 一染缸,以免把上一染缸溶液過多帶入下

一染缸,而影響切片質(zhì)量;

3、將其中一塊切片以蠟筆作一標(biāo)記(用作對照組切片),放入沸水中煮沸5分鐘;

4、將兩塊切片均放入AKP作用液中孵育30-60分鐘,作用液要事先預(yù)熱到37℃,水浴中進(jìn)行;

5、取出切片在蒸餾水中洗滌;

6、放入硝.酸.鈷溶液2-3分鐘;

7、蒸餾水沖洗干凈,否則切片易被污染,影響定位;

8、切片浸入硫化銨中2-3分鐘;

9、蒸餾水沖洗干凈;

10、經(jīng)各級酒精脫水。即30%乙醇→70%乙醇→90%乙醇→950%乙醇→100%乙醇(二)→100%乙醇(一),各級一分鐘。

我們擁有專業(yè)的實(shí)驗室、精良的實(shí)驗設(shè)備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,主要致力于基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、生物化學(xué)、病理檢測、基因檢測等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過高度細(xì)分、較好的的服務(wù)平臺,為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。目前,及,涉及臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域。


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