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上海萊睿科學(xué)儀器有限公司
主營產(chǎn)品： 安捷倫液相色譜儀,氣相色譜儀,尼高力紅外光譜儀,IKA磁力攪拌器,TOMY高壓滅菌鍋 |
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2017-11-1 閱讀(1759)
郁李仁為薔薇科植物郁李、歐李、榆葉梅、長梗扁桃等的種仁。郁李仁種子含苦杏仁甙，苦杏仁苷一般指維生素B17。它在化學(xué)上是兩種糖分子，即苯甲醛(benzaldehyde)和氰化物(cyanide)的化合物，作為藥劑，又稱Nitrilosides。苦杏仁苷可特異性地抑制阿脲所致血糖升高,作用強(qiáng)度與血液中苦杏仁苷濃度有關(guān)。苦杏仁苷還具有抗凝血作用。
傳統(tǒng)采用采用銀量法測定，但銀量法屬于間接測定方法，影響因素多，目前采用其他方法對郁李仁進(jìn)行含量測定的報(bào)道較少。使用液相色譜儀直接測定郁李仁中苦杏仁苷的含量，方法準(zhǔn)確、可靠，為郁李仁中苦杏仁苷的含量測定提供了依據(jù)和參考。
一、儀器與試藥
1儀器：
Waters液相色譜儀，Waters2487紫外檢測器，ZW色譜柱，恒溫箱，Empower色譜工作站，Agilent手動進(jìn)樣器（20μL）；十萬分之一電子分析天平，Cary60紫外分光光度計(jì)。
waters液相色譜儀HPLC
1.2試藥：
苦杏仁苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號110820-200403）；郁李仁藥材，經(jīng)鑒定分別為薔薇科植物郁李和長柄扁桃的干燥成熟種子。乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。
二、方法與結(jié)果
2.1色譜條件色譜柱：SupelcoODSC18（4.6mm×250mm，5μm）；流動相：甲醇-水（20∶80）；柱溫：25℃；流速：1.0mL/min；檢測波長：210nm，進(jìn)樣量：20μL。
2.2對照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥12h的苦杏仁苷對照品42.32mg，置10mL量瓶中，用70%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得苦杏仁苷4.232mg/mL的對照品溶液。
2.3供試品溶液的制備取郁李仁粗粉0.3g， 精密稱定，置具塞三角燒瓶中，加石油醚（60～90℃）50mL，回流提取1h，過濾，以石油醚分3次洗滌濾渣及容器，每次10mL，棄去石油醚液，濾紙 及濾渣揮干溶劑，置原容器中，精密加入70%甲醇溶液50mL，精密稱定，回流提取1h，放冷至室溫，再稱重，用70%甲醇補(bǔ)足失重，抽濾，精密量取續(xù)濾 液5mL置10mL量瓶中，以70%甲醇稀釋至刻度，以0.45μm濾膜濾過，取續(xù)濾液即得。
2.4線性關(guān)系考察精密量取苦杏仁苷對照品溶液1mL置10mL量瓶中，用70%甲醇稀釋至刻度，再依次稀釋，制得含苦杏仁苷211.6、105.8、52.9、26.45、13.225、6.6125、3.30625μg/mL的對照品溶液。分別精密吸取各20μL進(jìn)樣測定，以峰面積積分值對濃度進(jìn)行回歸分析，得苦杏仁苷回歸方程為：Y＝22645X＋10860，r＝1.0000；苦杏仁苷線性范圍為0.06613～4.232μg。
2.5精密度試驗(yàn)精密吸取同一供試品溶液重復(fù)進(jìn)樣6次，測得苦杏仁苷峰面積積分值的RSD＝0.86%。
2.6重復(fù)性試驗(yàn)取同一批次樣品6份，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定，結(jié)果苦杏仁苷的平均含量為3.16%，RSD＝1.35%。
2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液于配制后0、2、4、6、8、10、24h測定，計(jì)算峰面積RSD＝1.11%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。
2.8加樣回收率試驗(yàn)精密稱取已知含量的同一批次（批號080121）郁李仁粉末6份，每份約0.15g，脫脂后分別精密加入4.232mg/mL的苦杏仁苷對照品溶液1mL，依法制備供試品溶液并測定。
2.9樣品含量測定分別測定了小李仁、大李仁藥材各3批，采用外標(biāo)法計(jì)算苦杏仁苷的含量，結(jié)果符合要求。
