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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·12年您現在的位置： 翌圣生物科技（上海）股份有限公司>>分子生物學>> 10136ES012×Hieff CanaceTM High-Fidelity PCR Master Mix
具體成交價以合同協議為準
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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 10136ES01 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶預混液 | 10136ES01 | 100 μL | 86.00 |
2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶預混液 | 10136ES03 | 1 mL | 526.00 |
2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶預混液 | 10136ES08 | 5×1 mL | 1426.00 |
2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶預混液 | 10136ES25 | 25×1 mL | 5626.00 |
| 2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶預混液 | 10136ES50 | 50×1ml | 10455.00 |
| 2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶預混液 | 10136ES60 | 100×1ml | 19355.00 |
產品描述
2× Hieff Canace® PCR Master Mix是即用型2×預混合溶液，包含Hieff Canace® High-Fidelity DNA Polymerase，dNTP以及優化的緩沖體系。Hieff Canace® High-Fidelity DNA Polymerase是新一代的高保真DNA聚合酶，具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性，其保真性是Taq DNA聚合酶的52倍，是普通Pfu DNA聚合酶的6倍。擴增速度可達15 sec/kb。適用于復雜模板的擴增，擴增產物為平末端。
2× Hieff Canace® PCR Master Mix具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點，反應體系只需加入引物和模板即可進行擴增，簡化了實驗操作步驟，減少了人為誤差，提高了實驗通量和結果的重復性。本產品中不含染料，PCR產物需加入Loading buffer 后進行電泳。另外，該產品還含有特異保護劑，使得預混液反復凍融后仍可維持穩定活性。
產品應用
基因克隆；復雜DNA模板擴增；高通量建庫。
運輸與保存方法
冰袋運輸。-20℃保存。有效期2年。
注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
2）本產品僅作科研用途！
推薦PCR反應體系（冰上配制）
組分 | 體積 | 終濃度 |
ddH2O | to 50 μL | - |
DNA模板 | 適量 | - |
Primer正向 (10 μM) | 2.5 μL | 0.5 μM |
Primer反向 (10 μM) | 2.5 μL | 0.5 μM |
2× Hieff Canace® PCR Master Mix | 25 μL | 1× |
【注】：
1）聚合酶終濃度：在1×預混液含有1 U/50 μL的聚合酶。
2）引物：PCR反應體系中引物終濃度的范圍為0.2-1 μM，推薦0.5 μM。
3）Mg2+、dNTP終濃度：在1×預混液含有1.5 mM Mg2+和200 μM的dNTP。
4）高GC模板：在體系中加入終濃度為3%的DMSO可能有利于擴增。
5）不同模板的推薦使用量（50 μL反應體系）：
模板種類 | 擴增片段1 kb-20 kb |
基因組DNA | 50 ng-200 ng |
質粒或病毒DNA | 10 pg-20 ng |
cDNA | 1-5 μL (不超過PCR反應總體積的1/10) |
PCR擴增程序設置
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 98℃ | 0.5-3 min | 1 |
變性 | 98℃ | 10 sec | 30-35 |
退火 | 60℃ | 20 sec | |
延伸 | 72℃ | 15-30 sec/kb | |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【注】：
1）預變性溫度和時間：推薦使用98℃。預變性推薦時間：質粒DNA等簡單模板為30 sec；cDNA、基因組DNA等復雜模板為3 min；高GC含量模板為5-10 min。
2）退火溫度和時間：推薦使用60℃，也可根據需要，設立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度。推薦退火時間設置為20 sec，可以在10-30 sec內調節。退火時間太長可能導致擴增產物在膠上呈彌散狀。
3）延伸溫度和時間：推薦使用72℃。延伸時間推薦如下：質粒DNA等簡單模板為15 sec/kb；cDNA、基因組DNA等復雜模板為30 sec/kb，根據實際情況可延長至40 sec/kb。
4）擴增產物：請將PCR擴增產物放置于-20℃保存，防止該酶降解擴增產物。擴增產物為平末端，產物直接用于克隆，請使用平末端連接載體。
應用實例
圖1： Hieff Canace® 高保真PCR預混液擴增2.1 kb-6 kb目的片段。所有基因片段均可實現高特異性、高產量擴增。模板：擬南芥基因組DNA，50 ng/50 μL；退火溫度：60℃；延伸時間：30 sec/kb。M：1 kb ladder； 1：2.1 kb；2：3.1 kb；3：4.2 kb；4：5 kb；5：6 kb。
相關產品
產品名稱 | 貨號 | 規格 |
Hieff Canace® High-Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶 | 10135ES60/76/80 | 100/500/1000 U |
零背景TOPO-TA克隆試劑盒HOT | 10907ES20 | 20 T |
零背景TOPO-TA克隆試劑盒（不含MCS多克隆酶切位點） | 10908ES20 | 20 T |
零背景TOPO-Blunt平末端克隆試劑盒HOT | 10909ES20 | 20 T |
零背景TOPO-Blunt平末端克隆試劑盒（不含MCS多克隆酶切位點） | 10910ES20 | 20 T |
一步法快速克隆試劑盒HOT | 10911ES20 | 20 T |
多片段一步法快速克隆試劑盒HOT | 10912ES10 | 10 T |
定點突變試劑盒HOT | 11003ES10 | 10 T |
多點突變試劑盒HOT | 11004ES10 | 10 T |
HB210831
