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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 10 mg |
---|---|---|---|
貨號 | 40727ES10 | 應用領域 | 生物產業 |
DAPI 4’,6-聯脒-2-苯基吲哚
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 外觀 | 價格(元) |
DAPI 4’,6-聯脒-2-苯基吲哚 | 40727ES10 | 10 mg | 黃色粉末 | 459.00 |
產品描述
DAPI,也稱DAPI dihydrochloride,是一種常用的核酸染料,可以和雙鏈DNA富含AT序列的小溝結合,產生比自身強20多倍的藍色熒光。和EB(ethidium bromide)相比,DAPI對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI也可對RNA進行染色,染色機理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發出熒光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm),DAPI-RNA具有較長的大發射波長(500 nm),其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA的20%。
盡管DAPI不能通過活細胞膜,但可以通過提高濃度使之進入活細胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用來檢測酵母線粒體DNA,葉綠體DNA,病毒DNA,Microplasm DNA以及染色體DNA。
DAPI典型的藍色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細胞生物學多色熒光標記技術,因此也常作為核酸和染色體的復染劑用于細胞凋亡檢測、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測等領域,其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。推薦工作濃度為0.5-10 μg/L。
產品性質
中文名稱(Chinese Synonym) | 4’,6-聯脒-2-苯基吲哚 |
英文名稱(English Synonym) | 2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride; DAPI dihydrochloride 4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride; |
分子式(Molecular Fomular) | C16H15N5 ·2HCl |
分子量(Molecular Weight) | 350.25 |
CAS號(CAS NO.) | 28718-90-3 |
純度(HPLC Purity) | ≥95% |
熒光光譜(Fluorescence Spectral) | DAPI的Ex/Em=340 nm/488 nm; DAPI-DNA的Ex/Em=358 nm/461 nm |
結構式(Structure) |
|
運輸與保存方法
常溫運輸。粉末于4 ℃保存,需避光儲存,有效期3年。
注意事項
1)DAPI對人體有一定刺激性,請注意適當防護。
2)熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。
3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
配制母液
用雙蒸水溶解,終濃度為1-5 mg/mL。本產品不可以用緩沖液直接溶解。-20 ℃可保存1年,建議分裝保存,避免反復凍融
使用方法
1. 配制工作液:用雙蒸水或PBS稀釋母液,配制成所需要的工作的濃度(0.5-10 μg/mL),工作液可于4 ℃保存6個月。
2. 固定的細胞或組織染色:對于固定的細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的后進行。如果不需要進行其它染色,則直接進行DAPI 染色。
a)對于貼壁細胞或組織切片:加入適量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。
對于懸浮細胞:至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
b)吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360 nm,發射波長460 nm。
3. 活細胞或組織染色:
a)細胞培養物中加入適量DAPI染色液,約1/10細胞培養基體積,必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1 mL染色液,對于96孔板一個孔需加入100 μL染色液。
b)在 37 ℃培養細胞 10~20 分鐘。
c)用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360 nm,發射波長460 nm。
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HB190805