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D-Luciferin Firefly, Free Acid
D-螢火蟲熒光素,游離酸
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格(元) |
D-Luciferin Firefly, Free Acid D-螢火蟲熒光素,游離酸 | 40903ES01 | 100mg | -20℃干燥避光保存 | 708.00 |
D-螢火蟲熒光素,游離酸 | 40903ES02 | 500mg | -20℃干燥避光保存 | 2556.00 |
D-螢火蟲熒光素,游離酸 | 40903ES03 | 1g | -20℃干燥避光保存 | 3588.00 |
產品描述
D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整個生物技術領域,特別是體內活體成像技術。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素(底物)能夠被氧化發光。當熒光 素過量時,產生的光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關性(見下圖)。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質粒轉染入細胞后,導入研究動物如大小鼠體內,之后注入熒光素,通過生物發光成像技術(BLI)來檢測 光強度變化,從而實時監測疾病發展狀態或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響,根 據生物發光強度的變化來指示能量或生命體征。
D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染 檢測。目前市場上有三種產品形式,D-熒光素(游離酸),D-熒光素鈉鹽,以及D-熒光素鉀鹽。這三種產品主要的差別在于溶解特性上。D-熒光素(游離酸)水溶性以及緩沖體系的溶解性都很弱,除非溶于弱堿如 NaOH和KOH溶液,溶于甲醇(10mg/ml)和DMSO(50mg/ml)。鈉鹽和鉀鹽形式的D-熒光素能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中,使用方便,溶劑無毒性,特別適合體內實驗。配成液體后的這三種產品,在絕大多數的應用上都沒有實質性的差別。
產品性質
中文別名(Chinese synonym) | D-螢火蟲熒光素游離酸; |
英文別名(English synonym) | S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid; D-Luciferin Firefly, free acid |
CAS號(CAS NO.) | 2951-17-5 |
分子式(Formula) | C11H8N2O3S2 |
分子量(Molecular weight) | 280.33 g/mol |
外觀(Appearance) | 類白色至淺黃色粉末 |
溶解性(Solubility) | 溶于弱堿,難溶于水;溶于甲醇和DMSO |
純度(Purity)(HPLC) | >99% |
運輸和保存方法
冰袋運輸。
-20℃干燥避光保存。
使用方法
1 體外生物發光檢測
- 用弱堿(如 NaOH,KOH溶液)或DMSO溶解D-熒光素,游離酸,配制成30mg/ml的儲存液(200×)。混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存,避免反復凍融。注:首先用堿性pH溶液去溶解本品,如果有沉淀發生則需要調整pH至更高直至*溶解。之后可以重新用酸性溶液來中和,調整至所需的pH環境。
2) 用預熱好的組織培養基1:200稀釋儲存液,配制工作液(終濃度150µg/ml)。
3) 去除培養細胞的培養基直至無殘留。
4) 待圖像分析前,向細胞內添加1×熒光素工作液,然后進行圖像分析(或者細胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強信號)。
2 活體成像分析
1) 用弱堿或DMSO(w/o Mg2+)配制 D-熒光素工作液(15mg/ml),0.2µm 濾膜過濾除菌。混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存,避免反復凍融。一旦使用,放到 4℃解凍,保持冰冷且避光。
2) 注射量取決于注射方式,具體如下:
注射方式 | 劑量 |
靜脈注射(25-27gauge 針頭) | 按 10µl/g 體重濃度,加入相應體積的 15mg/ml 熒光素工作液 |
腹腔注射(25-27gauge 針頭) | 按 10µl /g 體重濃度,加入相應體積的 15mg/ml 熒光素工作液 |
肌肉注射(27gauge 針頭) | 50µl,濃度為 1-2mg/ml 熒光素工作液 |
鼻內注射(pipette) | 50µl,濃度為 3mg/ml 熒光素工作液 |
3) 注射入體內 10-20 min(待光信號達到zui強穩定平臺期),再進行成像分析。
注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,從而確定zui高信號檢測時間和信號平臺期。
注意事項
1) 本品(firefly luciferin)和甲蟲熒光素(beetle luciferin)都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)
-2-thiazoline-4-carboxylic acid,僅僅是不同公司在命名上的差異。
2) 本品保存和操作的過程中都要避光。另外儲存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復凍融。如果有條件,對儲存液充氮氣或氬氣(防止氧化),穩定性和保存時間更長,長達1年。
3) 注射方式,動物類型以及體重等都會影響信號的發射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,確定*信號平臺期和*的檢測時間。
4) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。