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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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產品簡介
產品介紹
*0 Chemically Competent Cell
（*0化學感受態細胞）
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
*0 Chemically Competent Cell （*0化學感受態細胞） | 11801ES76 | 100 μl×5管 | -80℃ | 110.00 |
11801ES80 | 100 μl×10管 | -80℃ | 180.00 |
產品描述
本品是采用大腸桿菌*0菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，可用于DNA的化學轉化。本品使用pUC19質粒檢測，轉化效率可達108 cfu/μg，廣泛適用于高效的DNA克隆和質粒擴增，能保證高拷貝質粒的穩定遺傳。
*感受態細胞基因型：F-mcrA△(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ△M15△lacX74 recA1 ara△139 △(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (Strr) endA1 nupG。
產品組分
編號 | 組分 | 產品編號/規格 | |
11801ES76（100 μl × 5管） | 11801ES80（100 μl × 10管） | ||
11801-A | *0感受態細胞 | 100 μl × 5 | 100 μl × 10 |
11801-B | pUC19（0.1 ng/μl） | 10 μl | 10 μl |
使用方法
- 取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。
注：一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100 μl，可以根據實際情況分裝使用，應注意所用的DNA體積不要超過感受態細胞懸液體積的十分之一。
- 向100 μl感受態細胞懸液中加入目的DNA，輕輕旋轉離心管以混勻內容物，在冰浴中靜置30min。
- 將離心管置于42℃水浴中放置60-90s，然后快速將管轉移到冰浴中，使細胞冷卻2-3min，該過程不要搖動離心管。
- 向離心管中加入900μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床振蕩培養45 min（150 rpm），目的是促使菌體復蘇，抗性基因表達。
- 將離心管內容物混勻，吸取100μl已轉化的感受態細胞加到含相應抗生素的SOB或LB固體瓊脂培養基上，用無菌玻棒輕輕的將細胞均勻涂開。室溫正置10 min，待液體被吸收后，倒置平板，37℃培養12-16 h。
注：涂布菌液多少可根據轉化DNA量來調整。如果預計的克隆較少，可通過離心后吸除部分培養液，重新懸浮菌體后將其涂布在一個平板上。剩余菌液可置于4℃保存，一周之內可重新涂板。
運輸與保存方法
干冰運輸。
*0感受態細胞-80℃保存，pUC19質粒-20℃保存。有效期半年。
注意事項
感受態細胞應保存在-80℃，不可反復凍融和放置時間過長，以免降低感受態細胞的轉化效率
