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產品介紹
REPOTMHNF4慢病毒報告基因是吉滿生物自主研發的用于檢測HNF4轉錄活性水平為目的的報告基因慢病毒顆粒。HNF4(Hepatocyte Nuclear Factor 4)是轉錄因子核受體超家族中的一員,參與肝細胞分化調控和維持肝細胞的生物學功能。HNF4α主要在消化系統、肝臟和腎臟表達,以及在白色脂肪組織和胰腺中也有少量的表達。HNF4α具有阻斷肝纖維化、肝硬化、肝癌的疾病進程,改善肝臟功能的作用。另外,HNF4α在肝干細胞移植方面也發揮重要作用,提高肝細胞移植的成功率。
REPOTMHNF4慢病毒報告基因主要用于檢測細胞中HNF4的轉錄活性、藥物研究以及基因過表達和RNAi的表型分析等。
pGMLVHNF4-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒載體的多克隆位點插入了多個HNF4結合位點,可以高靈敏度地檢測HNF4的激活水平。采用慢病毒作為報告基因的優點在于它能夠感染多種難感染的細胞,比如原代細胞,干細胞,神經元細胞等。而且慢病毒能夠將外源基因插入細胞基因組內,實現穩定轉染。
質粒圖譜:
質粒元件信息:
5'LTR | 1-635 |
PBS (primer binding site) | 636-653 |
Ψ (packaging signal) | 685-822 |
RRE (Rev-response element) | 1303-1536 |
cPPT (central polypurine tract) | 2028-2151 |
HNF4response element | 2191-2226 |
Luciferase | 2292-3944 |
PPGK(phosphoglycerate kinase promoter) | 3974-4482 |
Puror (puromycin resistance gene) | 4503-5102 |
WPRE(woodchuck posttranscriptional regulatory element) | 5116-5707 |
3'LTR | 5910-6546 |
PUC origin of replication | 7689-7016 |
Ampr | 8830-7834 |
包裝清單:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
GM-022022 | REPOTMHNF4慢病毒報告基因 | 50ul×4管;1×10e7TU/ml |
- | 說明書 | - |
使用說明:
HNF4報告基因慢病毒顆粒采用慢病毒轉染方法轉染哺乳動物細胞。用熒光素酶檢測試劑盒或雙熒光素酶檢測試劑盒進行檢測。
注意事項:
1. 病毒操作時使用生物安全柜,如使用普通超凈工作臺操作病毒,請不要打開風機。
2. 病毒操作時請穿實驗服,帶口罩和乳膠手套。
3. 操作病毒時必須特別小心,不要產生氣霧或飛濺。如操作時超凈臺有病毒污染,立即用10%次氯酸鈉溶液搽拭干凈。接觸過病毒的槍頭、離心管和培養板等需用10%次氯酸鈉溶液浸泡1h以上后棄去。
4. 用顯微鏡觀察細胞感染情況時應遵從以下步驟:擰緊培養瓶或蓋緊培養板。用70%乙醇清理培養瓶外壁后到顯微鏡出觀察拍照。離開顯微鏡試驗臺前,用70%乙醇清理實驗臺。
5. 病毒操作完成后,用肥皂清洗雙手。
保存條件:
-80℃保存。(如保存時間過長,使用前請重新檢測病毒滴度)
參考文獻:
[1] Onica T, Nichols K, Larin M, Ng L, Maslen A, Dvorak Z, Pascussi JM, Vilarem MJ, Maurel P, Kirby GM.
Dexamethasone-mediated up-regulation of human CYP2A6 involves the glucocorticoid receptor and increased binding of hepatic nuclear factor 4 alpha to the proximal promoter.
Mol Pharmacol. 2008 Feb;73(2):451-60. Epub 2007 Oct 31.
[2] Qadri I, Iwahashi M, Kullak-Ublick GA, Simon FR.
Hepatocyte nuclear factor (HNF) 1 and HNF4 mediate hepatic multidrug resistance protein 2 up-regulation during hepatitis C virus gene expression.
Mol Pharmacol. 2006 Aug;70(2):627-36. Epub 2006 May 2.
[3] Møldrup A, Ormandy C, Nagano M, Murthy K, Banville D, Tronche F, Kelly PA.
Differential promoter usage in prolactin receptor gene expression: hepatocyte nuclear factor 4 binds to and activates the promoter preferentially active in the liver.
Mol Endocrinol. 1996 Jun;10(6):661-71.
[4] Weber H, Holewa B, Jones EA, Ryffel GU.
Mesoderm and endoderm differentiation in animal cap explants: identification of the HNF4-binding site as an activin A responsive element in the Xenopus HNF1alpha promoter.
Development. 1996 Jun;122(6):1975-84.
產品價格:
貨號 | 名稱 | 產地 | 規格 | 報價/元 |
GM-022022 | Lentivirus HNF4 luciferase reporter 慢病毒報告基因顆粒 | Genomeditech | 50ul×4管; 1×10e7TU/ml | 3200 |