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上海寶葉生物科技有限公司
供貨周期 | 一個月 | 貨號 | IQ431 |
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ImmuQuest抗體:C4d補體片段單克隆抗體
主要描述: | C4d 補體 [LP69] |
目標抗原: | C4d 補體 |
目錄號: | 智商431 |
數量: | 0.1毫克 |
專注: | 1毫克/毫升 |
克隆: | LP69 |
主持人: | 老鼠 |
同種型: | 免疫球蛋白G1 |
免疫原: | 從正常人血漿中補充 C4d |
物種反應性: | 人類 |
純化: | 蛋白G親和層析 |
格式: | 含有 PBS + 10mM 純化抗體 |
應用: | IHC-P、IHC-Fr |
稀釋: | 很佳抗體稀釋度應通過滴定確定,但 IHC-P 的指導原則是使用 1:25-1:50 |
也稱為: | DADB-112B14.11、C4B1、C4B12、C4B2、C4B3、C4B5、C4F、CH、CO4、CPAMD3、FLJ60561、MGC164979 |
已發布 ID: | 34231390、27146825、23443736 |
Entrez 基因 ID: | 100293534、100507685、720、721 |
SwissProt ID: | p0c0l4, p0c0l5 |
Omim ID(s):: | 120810, 120820 |
協議
免疫熒光實驗方案 - 甲醛固定
從 Tcunit 收集細胞,并使用吸力從培養皿中取出培養基。
用 1x PBS 清洗并去除。
將細胞在預溫 (37°C) 多聚甲醛中在定軌搖床上室溫孵育 12 分鐘。
除去PFA并在1x PBS中的0.5% Triton X-100中在室溫下孵育5分鐘。
準備封閉試劑,這也是抗體稀釋液。
在室溫下用 1x PBS 洗滌細胞 2x,在軌道搖床上洗滌 4 分鐘/洗滌。
用 1% NCS 和 1x PBS 在室溫下封閉 30 分鐘。
準備一抗(50μl/蓋玻片)和濕染色室。
在室溫下用 lx PBS 清洗細胞 2x,并短暫風干。
在染色室中、黑暗中、室溫下與一抗一起孵育 1 小時。在此期間準備二抗。
用 1x PBS 清洗細胞 5 次(更換燒杯 5 次/每個燒杯計數 5 次)
在染色室中、黑暗中、室溫下與二抗一起孵育 1 小時。
用 1x PBS 清洗細胞 5x。
坐于大皮。
溶液(染色當天新鮮配制)。
* 1x 磷酸鹽緩沖鹽水。
* 封閉試劑:1% NCS,溶于 1x PBS(使用新鮮的 10x PBS)。
* 固定液:3.5% 多聚甲醛。
1.75g PFA 溶于 20 ml d.H2O 加 5 滴 1M NaOH 中。在 50-60°C 的熱板上攪拌直至溶解。添加 4 滴 HCl 并檢查 pH 指示條。 PH值應為7.4。用 d.H2O 補足體積至 25ml,并添加 25ml 2xPBS。添加到蓋玻片之前檢查 pH 值。
免疫熒光實驗方案 - 甲醇/丙酮固定
從 TCunit 收集細胞,并使用吸力從培養皿中取出培養基。
用 1x PBS 清洗并去除。
用冷甲醇:丙酮 1:1 在冰上固定細胞 10 分鐘。
準備封閉劑,這也是抗體的稀釋劑。
除去固定劑并在室溫下用1x PBS洗滌細胞3x,在定軌搖床上洗滌4分鐘/洗滌。
在 RT 下用 1% NCS 和 1x PBS 封閉 30 分鐘。
準備一抗(50μl/蓋玻片)和濕染色室。
在 RT 下用 1 x PBS 清洗細胞 2x,并風干約 7 分鐘。
在染色室中在黑暗中與一抗一起在室溫下孵育 1 小時。在此期間準備二抗。
用 1x PBS 清洗細胞 5 次(更換燒杯 5 次/每個燒杯計數 5 次)
在染色室中在黑暗中與二抗一起在室溫下孵育 1 小時。
用 1x PBS 清洗細胞 5x。
坐于大皮。
溶液(染色當天新鮮配制)
* 1x 磷酸鹽緩沖鹽水。
* 封閉試劑:1% NCS 溶于 1x PBS(使用新鮮的 10x PBS)。
* 固定液:甲醇:丙酮 1:1 冰冷。
蛋白質印跡實驗方案
將凝膠轉移到 PDVF 或硝酸纖維素膜上
將膜放入塑料托盤中,并在封閉緩沖液中攪拌一小時
在洗滌緩沖液中沖洗
在洗滌緩沖液加一抗中孵育一小時
用洗滌緩沖液洗滌 6 X 5 分鐘
在加二抗的洗滌緩沖液中孵育一小時
用洗滌緩沖液洗滌 6X 5 分鐘
檢測(例如 ECL、Amersham 根據制造商說明)
洗滌緩沖液
PBS + 0.1% 吐溫 20
封閉緩沖液
洗滌緩沖液+5%奶粉
所用抗體的濃度取決于每種抗體、抗原的量和所用的檢測方法。一般來說,稀釋度在幾百倍到幾千倍稀釋范圍內,但通常必須憑經驗確定。
ImmuQuest公司提供一系列*和新穎的抗體,以盡可能高的質量制造,處于科學研究的前沿。 我們所做的每一件事都是根據研究人員的需要來開發的。只要有可能,我們的抗體就會在WB、ELISA、IHC(冰凍切片和石蠟切片)和ICC/IF等應用程序中進行測試,并在我們的數據表中公布。許多都可以以定制的格式提供。Immuquest的大多數抗體都是在我們自己的嚴格控制下制造的。這意味著你將永遠知道你點的東西是高質量的。
上海寶葉生物科技有限公司 是一家專注于分子生物學、細胞生物學、細菌學、遺傳學、免疫學、生物化學、蛋白質學、細胞治療、臨床應用等領域,以銷售為主的生物技術公司。銷售的產品涉及,細胞株和菌株、胎牛血清、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細胞因子、技術服務、實驗耗材和消耗品、儀器設備等。客戶遍布大學、研究所、醫院、衛生防疫、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術公司和食品工業等單位。公司與國內外生物試劑供應商保持著密切的合作關系,有著非常好的貨源渠道, 可以在為用戶提供前沿和完備的產品和物流服務。公司的目標成為中國生命科學和生物技術等領域堅強的后盾,為這些領域的發展提供服務。以“質量是企業的生命,誠信是經營的資本"為警醒 ,嚴把所售出商品的質量關,不做任何有損顧客利益的事情。公司代理國內外眾多生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品,公司堅持“一站式"服務模式,為客戶全面解決實驗、生產、開發需求。公司整合與國內資源,加強網絡建設,提高公司內部運作效率,為客戶提供方便、快捷的服務。公司突出創新思維,提高工作效能,減低運作成本,為客戶提供優惠的價格。
ImmuQuest抗體:C4d補體片段單克隆抗體