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上海寶葉生物科技有限公司
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蛋白轉染是一種將外源蛋白導入細胞的技術,廣泛應用于基因功能研究、藥物開發和基因治療等領域。為了確保蛋白質轉染的效率和安全性。一、質粒DNA的提取與純化1.避免內毒素污染:在提取過程中,要特別注意去除內毒素,因為內毒素會影響細胞的生長和轉染效率。可以使用無內毒素的質粒提取試劑盒。2.定期檢測質粒質量:通過凝膠電泳或光譜光度計定期檢測質粒的純度和濃度,確保其滿足轉染要求。二、細胞培養的優化1.選擇合適的細胞系:根據實驗目的選擇合適的細胞系,常用于瞬時轉染,而Hela細胞則適合穩定轉染。2.控制細胞生
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深入研究像Vero這樣的細胞系會引發幾個問題:Vero細胞到底是什么?Vero細胞系是如何建立的?“Vero”這個名字背后有什么故事?本部分旨在闡明Vero細胞的起源和主要屬性。Vero細胞系的建立可以追溯到1962年,起源于非洲綠猴的腎上皮細胞。這個品系是由日本千葉大學的Y.Kawakita和Yasumura培育的。“Vero”一詞源自世界語中的“Verdareno”,翻譯成“綠色腎臟”,盡管“Vero”也與“真理”的概念產生了共鳴。Vero細胞通常形成單層,但可以適應懸浮培養,顯示出上皮樣結
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什么是瓊脂糖珠?瓊脂糖珠是具有不同粒徑和濃度的水凝膠。瓊脂糖由瓊脂二糖的重復單元組成。瓊脂糖珠通常是交聯和多孔的,因此蛋白質可以流過珠子。這些珠子可用于尺寸排阻或親和層析。對于親和層析,配體(如NTA或IDA)共價連接到瓊脂糖珠聚合物上,因此標記的蛋白質可以與其他蛋白質分離。幾十年來,瓊脂糖基質一直用于蛋白質純化,并且各種基于瓊脂糖的基質是可商購的。不同基質之間的物理性質差異很大。德國CubeBiotech是一家專注于蛋白相關產品的生產商和服務商,尤其擅長于蛋白純化及膜蛋白純化。CubeBiot
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dsGreen是一種特異性結合雙鏈DNA的熒光染料。染色方案有三種變體:凝膠浸泡、凝膠預染色和樣品預染色。凝膠浸泡瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠的經典方法。在瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中運行樣品。在燒杯中,將10µL10,000×dsGreenDMSO溶液添加至100mL1×TE、TBE或TAE緩沖液(對于小型凝膠),或將50µL10,000×dsGreenDMSO溶液添加至500mL1×TE、TBE或TAE緩沖液(用于中型凝膠)。用抹刀、棒或磁力攪拌器充分混合。將稀釋的dsGreen溶液倒入適當的托盤或平
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在某些情況下,蛋白質染色的影響可能會干擾后續分析。例如,當需要酶活性時,考馬斯染色;或者當氨基酸的共價修飾會產生虛假結果時,在氨基酸分析之前進行銀染色。在這些情況下,通常使用“導向帶”。引導條是與待分析泳道平行的泳道,包含尺寸標記或重復樣品。凝膠運行后,將導帶剪下并染色,然后與凝膠重新對齊并用作模板來引導條帶切除。該技術很簡單。常見的錯誤是染色后未能用電泳緩沖液重新平衡凝膠。由于許多污漬會導致凝膠收縮或膨脹,重新平衡對于準確和一致的重新調整是必要的。在引導帶技術中,平行泳道被切除并染色以引導帶切
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圖1.DNA大小選擇工作流程。混合:將MagVigen™納米顆粒與DNA/RNA樣品混合。結合:與樣品混合時,MagVigen™納米顆粒會結合所需的DNA/RNA大小片段。這種相互作用依賴于DNA/RNA分子和納米粒子表面之間的多種因素,例如電荷-電荷相互作用、親水/疏水相互作用、范德華力和其他分子間力。NVIGEN對磁珠的表面化學和緩沖環境進行了設計,為所需的DNA大小片段選擇提供理想的相互作用。清洗:珠子響應磁力(通過使用磁鐵,例如磁力分離架),使結合的材料能夠快速有效地與樣品的其余部分分離
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膜蛋白質組和分泌蛋白組被認為是很大和很重要的蛋白質類別之一。膜蛋白被定義為與細胞膜或細胞內細胞器相關或附著的蛋白質。它們分為外周蛋白和整合蛋白。外周膜蛋白暫時與脂質雙層相關,但不全跨越膜。與脂質雙層的附著是通過外圍區域的穿孔或通過與整合膜蛋白偶聯來實現的(參見圖3,B和C)。這些整合蛋白被嵌入,跨越整個脂質雙層,并包含駐留在膜內的疏水性α螺旋或β桶結構。根據它們的細胞功能,它們可以進一步細分為受體或通道等組。與親水性的胞外和胞內結構域一起,大多數膜蛋白表現出兩親性特征。兩親性特征還產生一種特征,
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一、簡介低聚木糖,又稱木寡糖,是由2~9個木糖單元,以β-1,4糖苷鍵連接而成的低聚糖混合物。S11137-25g低聚木糖BR,95%25g80.00現貨S11137-100g低聚木糖BR,95%100g180.00現貨S11137-500g低聚木糖BR,95%500g700.00現貨二、功效和應用低聚木糖不僅能量低,而且具有許多有益功效:1.促進有益菌雙歧桿菌增殖,同時產生多種有機酸,降低腸道pH值,抑制有害菌生長;2.低聚木糖的攝入,可減少有毒代謝產物形成,從而減少了肝臟分解毒素的負擔;3.