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蒸發光散射檢測器(EvaporativeLight-scatteringDetector)是通用型檢測器,可以檢測沒有紫外吸收的有機物質,如人參皂苷、黃芪甲苷等。
中文名稱
蒸發光散射檢測器
外文名稱
EvaporativeLight-scatteringDetector
作 用
檢測沒有紫外吸收的有機物質
類 屬
通用型檢測器
蒸發光散射檢測器(Evaporative light Scattering Detector, ELSD)已經開發生產15年,但是對于許多色譜工作者來說,它仍是一個新產品。*臺ELSD是由澳大利亞的Union Carbide研究實驗室的科學家研制開發的,并在八十年代初轉化為商品,八十年代以激光為光源的第二代ELSD面世。此后,通過不斷設計提高了ELSD的操作性能。現在ELSD越來越多的作為通用型檢測器用于液相色譜、超臨界色譜(SFC)和逆流色譜中。ELSDzui大的*性在于能檢測不含發色團的化合物,如:碳水化合物、脂類、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性劑、藥物,并在沒有標準品和化合物結構參數未知的情況下檢測未知化合物 。
ELSD的通用檢測方法消除了常見于傳統HPLC檢測方法中的難點,不同于紫外和熒光檢測器,ELSD的響應不依賴于樣品的光學特性,任何揮發性低于流動相的樣品均能被檢測,不受其官能團的影響。ELSD的響應值與樣品的質量成正比,因而能用于測定樣品的純度或者檢測未知物。示差檢測器(RI)也可以說是一種通用型檢測器,但它靈敏度低,并與梯度脫洗不相容。質譜是另一種通用型檢測器,但它的昂貴費用和操作復雜性限制了它的應用。
ELSD的*檢測方法,對于它的多種用途和高性能至為關鍵。
ELSD檢測只要分為三個步驟:(1)用惰性氣體霧化脫洗液(2)蒸發光散射檢測器流動相在加熱管(漂移管)中蒸發(3)樣品顆粒散射光后得到檢測。
蒸發光散射檢測器是一種通用型的檢測器,可檢測揮發性低于流動相的任何樣品,而不需要樣品含有發色基團。蒸發光散射檢測器靈敏度比示差折光檢測器高,對溫度變化不敏感,基線穩定,適合與梯度洗脫液相色譜聯用。
蒸發光散射檢測器已被廣泛應用于碳水化合物、類脂、脂肪酸和氨基酸、藥物以及聚合物等的檢測。
1) 可檢測揮發性低于流動相的任何樣品;
2) 流動相低溫霧化和蒸發,對熱不穩定和揮發性化合物亦有較高靈敏度;
3) 廣泛的梯度和溶劑兼容性,無溶劑峰干擾;
4) 輔助載氣提高了檢測靈敏度,保持檢測池內的
清潔,避免污染;
5) 高精度霧化和蒸發溫度控制,保證高精度檢測;
6) 可與任何HPLC系統連接。
ELSD與幾種常用的檢測器之間的對比
ELSD UV RID MS
應用范圍 通用 有光吸收的化合物 通用 通用
響應 質量相關 化學相關 折光度相關 質量相關
靈敏度 高 高 低 高
未知物檢測 能 不能 能 能
流動相影響/梯度 不影響 本底影響 影響 不影響
基線穩定性 好 較好 差 好
1.和液相色譜連接時需要信號轉換,如:和安捷倫液相相配時需要一個數模轉換器(35900E)
2.價格昂貴
3.使用不便,需要配置高壓氮氣或空氣,且實驗中產生廢氣有害。
蒸發光散射檢測器工作原理示意圖蒸發光散射檢測器的*檢測原理為,首先將柱洗脫液霧化形成氣溶膠,然后在加熱的漂移管中將溶劑蒸發,zui后余下的不揮發性溶質顆粒在光散射檢測池中得到檢測。
1、霧化:
液體流動相在載氣壓力的作用下在霧化室內轉變成細小的液滴,從而使溶劑更易于蒸發。液滴的大小和均勻性是保證檢測器的靈敏度和重復性的重要因素。
蒸發光散射檢測器,通過對氣壓和溫度的控制,確保在霧化室內形成一個較窄的液滴尺寸分布,使液滴蒸發所需要的溫度大大降低。
2、蒸發:
載氣把液滴從霧化室運送到漂移管進行蒸發。在漂移管中,溶劑被除去,留下微粒或純溶質的小滴。蒸發光散射檢測器采用低溫蒸發模式,維持了顆粒的均勻性,對半揮發性物質和熱敏性化合物同樣具有較好的靈敏度。
3、檢測:
光源采用激光,溶質顆粒從漂移管出來后進入光檢測池,并穿過激光光束。被溶質顆粒散射的光通過光電倍增管進行收集。溶質顆粒在進入光檢測池時被輔助載氣所包封,避免溶質在檢測池內的分散和沉淀在壁上,極大增強了檢測靈敏度并極大地降低了檢測池表面的污染。
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