【簡單介紹】
品牌 | 其他品牌 | 產地類別 | 進口 |
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應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
美國較有名BTX是專業的細胞融合、電穿孔儀的生產廠家。自從1983年起,苛求的科研工作者就已經把BTX產品作為電融合、轉基因等應用領域的*儀器。除了占世界的電融合、轉基因系統外,BTX的產品還包括多達25種相關的配件,其中有多種專業的電極,給用戶更多的選擇。
【詳細說明】
美國較有名BTX是專業的細胞融合、電穿孔儀的生產廠家。ECM系列產品在轉基因的應用領域中得以廣泛的應用,其無以倫比的高性能得到了同行的厚愛。BTX的系列產品適用于動植物、細菌、酵母、哺乳動物、人類細胞(包括活體細胞)的轉基因等操作,操作方法可參照相關文獻,及向廠商索要。
ECM630型BTX細胞電穿孔儀是多才多藝型細胞轉基因儀,適應于各類細胞。
BTX細胞電穿孔儀應用舉例:
10-500V電壓:適用于哺乳動物細胞,植物細胞
50-2500V電壓:適用于細菌、酵母各種型號,均有多種脈沖選擇
1、細菌/酵母轉化 (系統:ECM399/630)
電穿孔現在被認作是轉化細菌及酵母的zui有效的方法。革蘭氏陰性細菌(例如大腸桿菌)一般比革蘭氏陽性細菌更容易轉化,因為他們的細胞壁組成不同。對于革蘭氏陰性細菌常常可以獲得10的10次方轉化2/微克DNA的轉化效率,而對于革蘭氏陽性細菌,一般可以得到10的6次方轉化2/微克DNA。Chang等人(1997)成功對一個mtz-敏感的Heliobacter pylori菌株進行電穿孔以傳遞mtz抵抗性。Planelles等人(1999)使用電穿孔轉化大腸桿菌,以避免使用包裝物質。電穿孔儀器方面的進展將使研究人員能夠進一步優化細菌轉化(例如脈沖長度產生方面擴展的功能條件)。
RNA、DNA、蛋白質以及小分子都已經通過電穿孔的方法轉入酵母。沒有必要在電穿孔前部分去除酵母細胞壁,因為在完整酵母電穿孔方面的進展可以產生高的轉化率。Faber等人(1994)年優化了S.Cerevisiae的實驗方案,使用Hansenula Polymorpha獲得了比以前的報告增加300倍的轉化效率。
在質粒修復中,質粒從酵母轉入大腸桿菌以進行詳細的DNA序列分析,這是另外一種重要的技術。這種兩個步驟的過程被電穿孔進行了簡化,用于驗證隱性基因的結構,將其導入酵母,看基因性和表現性之間的關系。已經建立了標準的實驗方案使用指數衰減波發生器例如BTX ECM630轉化細菌/酵母。使用方形波電穿孔儀的實驗方案,例如BTX ECM830,來轉化細菌/酵母。研究人員還成功將大的質粒(BAC及YAC)導入細菌。電穿孔杯是細胞及酵母電穿孔的zui常用附件,而Model747共軸電極使用則變得越來越普遍。
2、動物細胞轉染 (系統:ECM630/830)
對真核細胞的轉染可以通過多種方法獲得,例如磷酸鈣沉淀、脂質體轉染、病毒方法以及電穿孔。電穿孔已經被正式對傳統的轉染方法不靈的細胞有很好的效果,因此被選為*的分子傳遞系統。電穿孔的好處有可重復性、更高的效率、大量樣本處理、無毒性以及容易使用(不需要孵育時間)。
Lofin等人(1999)對NIH/3T3細胞進行電穿孔使mRNA進入,以研究細胞周期及細胞分化過程中mRNA對基因表達調節、控制。Bodwell等人(1999)在對COS-7細胞進行電穿孔是使用較長的脈沖時間后獲得了較高水平的表達。Warner等人(1997)使用電穿孔方法成功轉化了淋巴細胞。Incyte Genomics公司成功使用BTX電穿孔儀轉染了ES細胞進行轉基因小鼠的生產。BTX ECM399\630\830型儀器、電穿孔杯以及多種特用的電極都用于動物細胞轉染用途。
3、蛋白質電整合/電插入 (系統:ECM630/830)
將蛋白質導入細胞以及將蛋白質插入至細胞膜中也可以通過電穿孔來實現。不光肽段,而且包括抗體的多種蛋白,也可以進行導入。Ushio-Fukai等人(1998)對電穿孔插入哺乳動物細胞中的外源蛋白進行了定量。對于這些用途可以使用多種BTX電極。
4、植物細胞轉化 (系統:ECM630/830)
對植物原生質(玉米、煙草等)及完整植物的電穿孔可以用于產生對農業/園藝有用的轉基因作物。植物細胞轉化的一個主要目的是對植物細胞進行穩定轉化以產生具有優良品質及產量增加的作物。Lin等人(1997)優化了多種植物上用于GUS表達的電穿孔條件,結果顯示完整植物細胞以及原生質都可以進行有效轉化。Diaz等人(1994)針對小麥及燕麥的葉和根的原生質進行了相似的優化試驗,證明了電穿孔對于植物工作的有效性。這些作者也比較了電穿孔與PEG的差別,結果發現電穿孔更有效、更有重復性、更經濟。BTX是世界上體內轉染用特殊電極的者。對于這些用途可以使用多種BTX電極,例如2針陣列、游標尺電極 、以及Tweezertrodes。
5、貼壁細胞的轉染----ACT (系統:ECM630/830)
除了對盛在普通樣品杯的懸浮細胞進行電穿孔外,還可以對多種培養板上的貼壁細胞進行原位電穿孔。這樣可以避免用*酶消化細胞,有助于保持細胞的活性及細胞數目。Lewis等人(1999)使用培養皿電極將基因轉染入人類及靜脈內皮細胞。Paptis等人(1998)通過對長在導電載玻片的NIH/3T3細胞進行原位電穿孔研究信號轉導。Teruel等人(1999)也對位于載玻片上的海馬神經細胞轉入DNA、RNA以及多種大分子。BTX為貼壁細胞的轉染(ACT)提供了PP35-2、366、747、840及Epizap電極系統。請關注不久后為這些用途開發的新產品
6、高通量篩檢----HTS (系統:ECM630/830)
高通量篩檢及cDNA文庫的建立,需要一次處理多個樣本的能力。使用傳統樣品杯花費很大而且有時間限制。然而,96孔板里使用的電極對于這些類型的應用肯定有用。Hoffma-Tsay等人(1994)使用96孔共軸電極在植物融合實驗中檢測8種化學物質。Peterfy等人(1995)比較了多種類型的多孔電極,將DNA傳遞入COS-7細胞。Marrero等人(1997)使用多孔電極將抗體電導入血管平滑肌細胞,以誘導細胞增值。BTX目前提供747和840用于這樣的用途,并且不斷開發新的產品。
7、大容量生產(LVP)及先體外后體內基因治療 (系統:ECM600F)
工業用大容量生產或者先體外后體內基因治療也為社會所需。人們可以先在樣品杯里優化條件然后將實驗方案轉成流水線作業,將實驗進行比例放大。BTX ElectroFlowPorator系統有一個泵及一個改進了的電穿孔儀組成。泵可以進行編程并與電穿孔儀進行同步操作,以將脈沖傳遞多批的細胞。Parham等人(1999)使用流動性系統優化了CHO、COS-7、HEK293、NSO、CV-1細胞的短暫基因表達,,獲得了滿意的結果。
技術規格 工作狀況:
具有開機自檢功能
接 口: 數字式用戶接口
輸入電壓: 110V/220VAC
充電時間: *長5秒
電壓范圍: 10-500V低壓工作模式/每次1V調進50-2500V高壓工作模式/每次調進5V
電 容: 1μF,25μF-3275μF低壓工作模式每次25μF調進25μF,50μF高壓工作模式
電 阻: 25-1575W調進/每次25W調進(高壓工作模式)
脈 沖: 低壓工作模式>8300RC時間常數
高壓工作模式>126RC時間常數
安 全: 抗短路保護*長延遲10秒
其它指標: 電流量:低壓工作模式限6000A
高壓工作模式限3000A
物理參數: 尺寸:12.5"×12.25" ×5.5"(W×D×H)
重量:10磅(4.5公斤)
顯示:20×4位LCD液晶顯示屏
控制器:旋轉式電壓選擇鈕按壓式電源開關及乒乓式觸發開關
監測:能監測電壓峰值Vp及RC充放電時間常數
BTX Molecular Delivery Systems is regarded as a pioneer in the field of molecular delivery utilizing electroporation and electrofusion technology.
BTX offers a comprehensive line of instruments and accessories for both electroporation and electrofusion of mammalian, bacterial, yeast, fungi, insect and plant cells and tissue. We specialize in providing research tools for novel cutting edge applications such as adherent cell electroporation, high-throughput cloning, large volume electroporation, in vivo gene delivery, in ovo gene delivery, and in & ex utero gene delivery.
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