賽默飛學術科研利器眾多,液相色譜儀則是分析實驗室最常用、最基礎的技術手段之一。科研人在探索科學規律的同時,液相色譜還能如何助力創新,且看飛飛跟您一一分享:
01
貫穿產學研的有力紐帶——液相色譜技術支撐
產學研協同創新、技術轉移是實現科研成果從高校走進企業、從實驗室走向生產線、從理論探索走上實際應用的最佳模式之一。以中藥新藥研發為例,中藥經典名方復方制劑新藥研發前期研發周期長,內容包含本草考證、資源評估、炮制加工、質量研究、中試工藝等,其中基于液相色譜法建立的指紋圖譜、多成分含量測定項被認為是質量評價關鍵指標,同時需要重點考察飲片-物質基準-制劑中目標成分的量值傳遞關系,進而指導生產工藝的調整和優化。國內多所高校與中醫藥科研機構積極與藥企合作,采用賽默飛Vanquish UHPLC及Ultimate 3000完成了多個中藥經典名方品種(如:化肝煎[1]、厚樸溫中湯[2]、黃連湯[3]等)的質量標準前期研究,并發表論文數十篇,為該類新藥研發與生產提供了完善、科學的技術支撐,不斷推進中藥現代化的創新之路。
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02
定量無紫外吸收目標物——CAD檢測器方法開發
電霧式檢測器(Charged Aerosol Detector,CAD)在無紫外吸收成分定量應用顯示極大優勢,有效解決了無發色團的成分檢測難題,明顯改善了UV低波段的漂移與低靈敏度問題,且成功規避了RI/ELSD檢測方法開發的限制,因此,在各個行業的標準化研究中成為了一個備受關注的液相色譜檢測器,具體可見下方圖片。科研學界采用CAD進行創新研究時,常見科研思路有:
① CAD定量原理與響應一致性基礎研究[4,5];
② CAD與其他檢測器檢測方法對比研究[6];
③ 現行質量標準提升研究[7];
④ 藥學研究與新藥開發(中藥活性成分[8]/化藥有關物質[9]/生物藥新型遞送系統[10]等);
⑤ 復雜體系研究等等[11]。
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02
專注復雜體系研究——在線二維液相色譜合理運用
賽默飛雙三元液相色譜是賽默飛液相家族中的明星產品,一個機箱內部同時含有2個三元梯度泵,在開展二維液相色譜分析時可為科研人員帶來極大便利,目前可支持的工作流程包括:在線固相萃取液相色譜(Online SPE-HPLC)、中心切割二維液相色譜(Heart cutting 2D-LC)、Simple Switch™多功能二維液相色譜等等。
上述工作流可為植物、藥物、食品、生物大分子等復雜體系分離分析時解決以下問題:
① 目標成分含量低,需要富集后再分析;
② 手動前處理操作繁瑣,期望簡化操作,降低前處理耗材費用;
③ 共流出峰在一維難分離,需要收集后再分離;
④ 色譜流動相與質譜不兼容,但又迫切需要開展鑒定工作等。
近年來,科研工作者基于賽默飛2DLC發表多篇應用型論文,如:中心切割法用于特殊醫學用途奶粉中的牛磺酸定量分析[12];OnlineSPE-HPLC-FLD用于快速檢測牛奶中5種氟喹諾酮抗生素殘留[13];多中心切割法用于中藥人參皂苷定量分析[14]等。隨著研究的拓展,CAD、HRMS等新穎檢測器與2DLC聯用也逐漸成為科研新熱點[15]。
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04
讓深入研究變得更容易——分析純化液相不可少
生命科學領域近年來不斷實現突破,新的治療模式包括雙特異性抗體/蛋白、抗體偶聯藥物、細胞和基因療法推動了生物制品行業的崛起,科研人員仍在挖掘活性更強、靶向更準的生物大分子,并搭建新型的藥物遞送載體。為了獲得更穩定的治療效果,生物大分子的質量評價面臨系列挑戰,一方面,處于新藥開發前沿的實驗室,通常面臨樣品基質復雜,目標雜質或活性化合物豐度低,流動相質譜不兼容等突出問題,需要將目標物進行高效分離與精準純化;另一方面,科研人員希望為化合物表征或下游工作流程提供的高效純化,兼具智能化、自動化,簡化后續結構解析和表征的復雜性,即在不同的分析技術手段間實現有效連接,如電鏡檢測前的樣本制備等。賽默飛餾分收集器作為核心模塊,將高分離度的 UHPLC 分離和快速準確的樣品純化相結合,助力科研客戶搭建一整套功能強大、靈活易用的平臺。
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有效改善分離與保留——不同機理色譜柱的創新使用
色譜柱是液相分離的核心部件,其填料創新發展極為迅速,賽默飛現擁有多種類型液相色譜柱類型可供科研客戶選擇,有:耐用性強通用性好的反相色譜柱(C18/苯基柱等)、特殊應用專用柱(Hypersil Green PAH 、Accliam Surfactant Plus 等)、新型生物色譜柱(ProPac 、MabPac 、DNAPac RP/IEX/SEC等)及特色混合模式色譜柱(Acclaim Mix mode、Trinity P1/P2/Q1)等,可支持科學研究中各類檢測項目。
隨著科研深入,賽默飛可提供在線工具(制備式 HPLC 色譜柱方法變換工具,掃碼查看)將您的分析柱方法直接放大成制備柱方法,并支持定制制備式HPLC色譜柱,滿足科學研究中從發現到制備的全分析流程。
小結:
賽默飛可提供科學研究中使用的各類色譜質譜儀器、耗材及軟件,其中液相色譜產品也是各個學科的必備神器:不僅擁有豐富的色譜檢測器類型(UV/FLD/RI/CAD等),可輕松實現多檢測器串聯(UV-CAD/UV-FLD等),一針進樣,即可完成多角度表征樣品信息;還支持不同分析技術聯合使用,如①UHPLC-HRMS聯用;②全自動在線LC-GC聯用;③在線LC-ICPMS聯用等,將創新再推向新高度,化合物信息全面表征不再困難。
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賽默飛科普小貼士
作為賽默飛專利技術CAD的首本專著,《電霧式檢測在液相色譜及相關分離中的應用》匯集了研發團隊二十余年研發與應用經驗,由46位國際學者、產業界專家、業內人士聯合編撰,是不可多得的電霧式檢測器應用紅寶書,英文版上市后備受好評。中文版特邀國內知名專家學者傾力譯作,是目前第一本也是唯一一本系統總結CAD原理及應用的專著。
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參考文獻:
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[5] Imad A. Haidar Ahmad, Andrei Blasko, Heather Wang, Tian Lu, Ian Mangion, Erik L. Regalado,
Charged aerosol detection in early and late-stage pharmaceutical development: selection of regression models at optimum power function value, Journal of Chromatography A, Volume 1641,2021.
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[14] Yao CL, Yang WZ, Wu WY, Da J, Hou JJ, Zhang JX, Zhang YH, Jin Y, Yang M, Jiang BH, Liu X, Guo DA. Simultaneous quantitation of five Panax notoginseng saponins by multi heart-cutting two-dimensional liquid chromatography: Method development and application to the quality control of eight Notoginseng containing Chinese patent medicines. J Chromatogr A. 2015.
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