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高立紅 韓春霞 鄭洪國
糖類是自然界中廣泛分布的一類重要的有機化合物,在生命活動過程中起著重要作用。由于其具有改善腸道菌群,以及抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、降血糖降血脂等作用,廣泛應用于食品和醫藥領域。因此,糖類物質的分析檢測在食品和藥物質量控制方面具有重要作用。
糖類分析難點:
1. 極性強并且同分異構體較多,常規色譜柱對其保留和分離效果欠佳;
2. 無紫外吸收或較弱,一般檢測器無法直接檢測, 需要衍生后進行測定,操作復雜并且某些熱不穩定的糖回收率差。
基于糖類物質的化學特征,以及常規分析檢測難點,采用離子色譜法(IC)進行檢測具有多種優勢:
1.糖分析色譜柱對糖類物質具有很好的保留和分離效果;
2.脈沖安培檢測器(PAD)對糖類物質具有特異性響應和高靈敏度;
3.無需衍生即可直接檢測,重復性好;
4.單雙糖、低聚糖、多聚糖、糖醇、氨基糖、酸性糖均可進行檢測。
快來圍觀離子色譜在糖分析中的優異表現吧!
單雙糖分析
分離度和靈敏度齊飛——賽默飛ICS-6000高壓離子色譜儀,配置*的單雙糖分析色譜柱,脈沖安培檢測器,使離子色譜輕松應對半乳糖、葡萄糖、木糖、果糖、蔗糖、乳糖、麥芽糖等常見單雙糖的測定。僅需5~25 μL小體積進樣即可檢測ng/L~mg/L級別單雙糖,無需衍生化,靈敏度高,選擇性好。
IC-PAD測定常見單雙糖
1-巖藻糖;2-鼠李糖;3-阿拉伯糖;4-半乳糖;5-葡萄糖;6-蔗糖;7-木糖;8-果糖;9-乳糖
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脫水糖和糖醇分析
對PM2.5大氣顆粒物中糖類物質進行監測可以有效幫助識別大氣顆粒污染物的成因和來源。采用ICS-6000離子色譜儀脈沖安培法測定大氣顆粒物中左旋葡聚糖、甘露聚糖和半乳聚糖,無需衍生可直接測定,操作簡單重復性好;并且與顆粒物中阿拉伯糖醇和海藻糖等干擾物質具有有效分離;當樣品提取液為10 mL,左旋葡聚糖、甘露聚糖和半乳聚糖的檢出限可達到0.02 μg,靈敏度高。
IC-PAD測定大氣顆粒物中脫水糖和糖醇
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低聚糖和多糖分析
1. 國家標準方法依從
2016年出臺的三項食品安全國家標準:《GB5009.245-2016食品中聚葡萄糖的測定》、《GB5009.255-2016食品中果聚糖的測定》、《GB5009.258-2016食品中棉子糖的測定》均采用賽默飛離子色譜條件進行測定。賽默飛ICS-6000高壓離子色譜儀,配置四元梯度泵和脈沖安培檢測器,四電位波形測定,靈敏度高,重復性好,助您輕松應對標準法規。
2. 乳粉中的低聚半乳糖
低聚半乳糖(GOS)是一種具有天然屬性的功能性低聚糖,嬰幼兒奶粉中都添加了低聚半乳糖的營養成分,因此是奶粉中的必檢項目。賽默飛自主研發建立使用低聚半乳糖原料為對照品直接測定低聚半乳糖的方法。利用不受奶粉本底干擾的色譜峰來定性定量,不受樣品中高含量乳糖的干擾,可準確測定嬰幼兒奶粉中的低聚半乳糖。此方法無需酶解,降低成本,但對色譜柱分離能力和檢測器靈敏度要求較高,賽默飛ICS-6000高壓離子色譜儀,配置脈沖安培檢測器和Carbopac PA20色譜柱,可*高靈敏度和分離度的要求。
IC-PAD測定不同廠家的低聚半乳糖譜圖
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3. 淀粉多糖的分析
對于聚糖分析,即使聚合度大于100的淀粉,離子色譜法也仍有很好的分離度和靈敏度,可分離出多達132個峰!其他檢測方法*!
IC-PAD測定玉米淀粉譜圖
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糖型結構分析
由于賽默飛離子色譜無需衍生、靈敏度高以及糖色譜柱you秀的保留分離能力,其在注射液糖類分析、多糖疫苗/多糖蛋白結合疫苗和糖基化蛋白藥物分析等方面亦有you秀表現。
糖基化對蛋白藥物的療效,穩定性,免疫原性具有重要的影響。糖基化蛋白經酶切后,N-糖鏈無需衍生即可直接離子色譜進樣分析,避免了衍生過程中唾液酸的降解,減少樣品前處理步驟和時間。2020版中國藥典新增單抗N糖譜分析,采用ICS-6000高壓離子色譜儀,配置脈沖安培檢測器和Carbopac PA200色譜柱進行測定。此外,賽默飛*的IC-Q Exactive高分辨質譜聯用技術,可鑒定出更多的糖型,適用于復雜唾液酸修飾的糖型,可極大的完善和推動糖蛋白類藥物N-糖鏈的質控分析。
單克隆抗體N-糖鏈 (a) LC-MS/MS完整分析流程, (b) IC-MS分析流程
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IC-PAD和IC-QE檢測N-糖型結果
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zui后為大家總結了離子色譜法測定糖類物質的標準方法和推薦色譜柱,誠意滿滿!!!
離子色譜法測定糖類物質標準方法和推薦色譜柱
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