普利萊 P1258-50 植物總蛋白提取試劑
普利萊 植物總蛋白提取試劑-常備現貨
產品貨號：P1258-50
產品名稱：植物總蛋白提取試劑
產品規格：50ml/100ml
產品簡介：
適用范圍：
提取多種植物組織和細胞如蘋果、花生、土豆、煙葉、菠菜、梅花等。
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
描述：
植物組織成分復雜含有較多的酚類物質、多糖、色素、次生代謝產物，這使得植物蛋白質的分離提取變得困難。本試劑適用于多種植物根、莖、葉及果實等的新鮮或凍存組織，能夠快速有效地提取植物中的可溶性和疏水性蛋白成分，有效去除組織中所含的多糖、脂質、此生代謝產物等干擾蛋白研究的成分，同時能夠使提取的蛋白質處于最佳的活性狀態和檢測狀態，適用于酶學活性測定，單向、雙向蛋白電泳、Western Blot和免疫共沉淀等實驗。
儲存：4oC避光保存，12個月有效
操作步驟；
1. 組織勻漿，必須充分勻漿，這一步非常關鍵。
（1） 凍存組織勻漿：預先將研缽至于-20oC或-70oC冰箱內預冷。取液氮凍存的植物組織，放入冰凍的研缽內研磨成粉末，注意使樣本處于冰凍狀態，如樣本顏色加深或變黑通常表明已經融化。將研磨好的組織轉移到新管，按每200mg植物組織加0.5mL比例加入提取試劑，混勻后冰上放置20分鐘，期間可數次顛倒混勻，使蛋白溶解。
（2） 新鮮組織勻漿：取新鮮組織放入研缽中，按每200mg植物組織加0.5mL比例加入提取試劑，充分研磨至勻漿液中看不到大的塊狀或者片狀組織，保證樣本wan全研磨破碎。轉移至離心管內，冰上放置20分鐘。
2. 離心：12000g離心15分鐘，將上清液轉移至新的離心管中，直接使用或-70oC儲存。
3. 后續處理：
（1）如果進行酶學測定，直接取蛋白上清液加入反應。
（2）沉淀蛋白；首先估計制備的蛋白上清液體積。方法一：加1/3體積30%三氯醋酸水溶液；方法二：加入6-10倍體積的1:1混合的丙酮/乙醇,-20oC沉淀1小時或過夜。4oC，5000g離心10分鐘，棄上清，空氣略干沉淀，用適量的1*SDS上樣緩沖液溶解沉淀，95 oC變性5分鐘，上樣電泳。適于進行SDS-PAGE、Western Blot、雙向電泳等。
（3）直接電泳：需加入4*SDS上樣緩沖液。上清如有少量色素一般不會影響蛋白電泳。
（4） 免疫共沉淀：用蒸餾水等比例稀釋提取的蛋白上清，進行免疫共沉淀。
（5） 蛋白定量：用BCA蛋白定量試劑盒進行定量（產品貨號P1511）.
常見問題集解決方法：
1. 提取的蛋白量少：1）組織蛋白含量較少，如水果等，可增加組織量；2）組織勻漿不充分，如纖維較多的組織破碎較困難，應適當延長研磨時間；3）組織過老或水分丟失致使其干燥，應盡量選用新鮮較嫩的組織；4）甲醇或丙酮沉淀后蛋白溶解不充分，應延長溶解時間或使用較強的蛋白溶解劑。
2. 蛋白質量不佳：1）提取的蛋白有多酚或色素等雜質殘留，可重復用丙酮或甲醇沉淀；2）蛋白質降解，操作個步驟應迅速，在冰上進行，用戶也可以自行選擇加入蛋白酶抑制劑。
普利萊 植物總蛋白提取試劑-常備現貨
產品訂購信息：
P1258-50 植物總蛋白提取試劑 50ml/100ml
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