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親和層析填料

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更新時間:2023-05-29 15:32:03瀏覽次數:526

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產品簡介

供貨周期 兩周 應用領域 生物產業,制藥,綜合
親和層析填料:親和層析是基于生物分子與其他配基分子之間(如抗原與抗體、酶與底物、激素與受體、核酸中的互補鏈、多糖與蛋白復合體等)的特異性吸附原理建立和發展起來的。通過介質上的配基與目標分子之間的特異性吸附來實現純化目標分子的目的。由于這種特異性的作用力,親和層析具有高度選擇性、高活性回收等特點。

詳細介紹

親和層析填料親和層析是基于生物分子與其他配基分子之間(如抗原與抗體、酶與底物、激素與受體、核酸中的互補鏈、多糖與蛋白復合體等)的特異性吸附原理建立和發展起來的。通過介質上的配基與目標分子之間的特異性吸附來實現純化目標分子的目的。由于這種特異性的作用力,親和層析具有高度選擇性、高活性回收等特點。

 

1. His標簽蛋白

過渡態金屬離子(Cu2+>Ni2+>Zn2+>Co2+)能夠與電子供體,如N、S、O等原子以配位鍵結合,金屬離子上剩余的空軌道是電子供體的配位點,在溶液中會被水分子或陰離子占據,當蛋白質表面氨基酸殘基(His)與金屬離子的結合力較強時,氨基酸殘基的供電原子就會與金屬離子結合形成復合物,取代原先結合的水分子或陰離子,這樣就能使蛋白質分子結合在固體表面。His標簽蛋白的His和介質結合,由于蛋白質表面的氨基酸的種類、數量、位置和空間構象不同,因而具體使用時根據金屬配基的親和力大小不同,選擇不同的金屬配基進行分離純化。

圖片5.png

★螯合離子(和His結合力)Cu2+>Ni2+>Zn2+>Co2+,其中:Cu2+結合力強,Ni2+常用,Co2+結合力較弱而分辨率高。

根據螯合方式不同,又分為IDA,IMAC,TED三種。

圖片6.png

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2. GST標簽蛋白

GST能特異的與GSH結合,表現為酶和底物的作用原理,利用這個原理,將GST做成標簽表達出融合蛋白,與GSH配基的親和介質特異性結合,從而純化出目標蛋白。GST融合蛋白純化的特點是:純度高,純化條件溫和保持蛋白活性,促進蛋白可溶性表達等。

 

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3. C3H7NO3蛋白酶

C3H7NO3蛋白酶純化親和介質,是將C3H7NO3蛋白酶的廣譜抑制劑對氨基苯甲醍偶聯在瓊脂糖微球Focurose FF和高強度交聯的瓊脂糖Focurose 4FF制備而成,稱為Benzamidine Focurose FF(LS)和Benzamidine Focurose 4FF(HS)。

 

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4. Protein A/Protein G

將Protein A和Protein G等物質偶聯在高強度交聯瓊脂糖上,廣泛用于抗體的純化。

 

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5. Plasmid

質粒DNA是一類能在細菌染色體外自主復制的環形雙鏈DNA分子。不同類型的質粒DNA分子量大小不同,大的可達到10^5kDa,小的則僅為10^3kDa左右。質粒DNA的構型一般分為超螺旋、幵口環狀或線性3種,此外它們各自還可能會形成聚體。初步純化的質粒DNA溶液中常混有3種構型,并且摻雜一定量的蛋白質、RNA、內毒素以及宿主基因DNA,這些雜質會影響后續的應用,因此質粒DNA需要進一步精細純化。我公司具備成熟的質粒純化整體解決方案(三步法、兩步法)和產品服務。Plasmid系列填料純化原理是利用配基的嗜硫吸附,適用于分離純化閉環的超螺旋質粒DNA。

 

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6. 預活化

預活化介質也稱為親和介質活化中間體,是在各種交聯強度瓊脂糖的基礎上,通過不同的偶聯方法鍵合上不同的活性基團(活性間隔臂)。通過活性基團可進一步偶聯各種配基,用于制備其它介質(主要是親和介質)及固定相應物質,用戶可根據自己需求把待偶聯的配基很容易地偶聯上去,避免了前期接活性基團的繁瑣工序。

 

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