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科研犬甲狀腺素(T4)ELISA檢測試劑盒需要自備儀器及設備:
1)450nm濾光片酶標儀(Standard microplate reader)
2)高精度加樣器及槍頭(Precision pipettes and Disposable pipette tips.)
3)37攝氏度恒溫箱(37 ℃ incubator)
注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、15、30、60、120、240 ng/mL
試劑的準備:20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法:
1. 手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
科研犬甲狀腺素(T4)ELISA檢測試劑盒樣本的準備和保存:如果不立即分析,應分裝后冷凍保存,且避免反復凍融。
【血清樣本】:用干凈試管收集血液。室溫凝固 30 分鐘,離心 1000×g15 分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
【血漿樣本】:采用 EDTA 抗凝,抽血后 30 分鐘內離心 1000×g15 分鐘。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
【細胞培養、組織勻漿、體液】:離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
試劑盒組成
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
標準品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、15、30、60、120、240 ng/mL
在ELISA試劑盒的使用過程中常見的問題有很多。如:加樣器不正 確、保溫設備不良、洗滌用水不規范等等對檢測結果影響極大。我司為您準備了以下解決問題的方法:
1. 樣品加樣時要仔細,以防漏加錯加。加樣后,反復抽吸3次混勻,防止血清聚集在孔底,從而導致非特異性吸附。
2. 每次洗滌時應靜止30秒,選用吸水紙作為襯墊,洗滌后甩干孔內水分 。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 在儲存和溫育時應避免強光直射。
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