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檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被L-半乳糖-1-磷酸酯酶(GPP)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的L-半乳糖-1-磷酸酯酶(GPP)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品活性。
植物L-半乳糖-1-磷酸酯酶(GPP)ELISA試劑盒組成:(標準品(S0-S5)濃度依次為:0、15、30、60、120、240 U/L)【酶聯板Assay plate 】、【標準品Standard】、【稀釋液Sample Diluent】、【檢測抗體HRP-Conjugate reagent】、【終止液Stop Solution】、【底物溶液Chromogen Solution】、【20x濃縮洗滌液20X WashSolution】、【說明書User manual】、【封板膜Closure plate membrane】、【自封袋Sealed bags】
實驗注意事項:
1)嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果,所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃,使用后立即冷藏保存試劑。
2)洗板不正確可以導致不準確的結果,在加入底物前確保盡量吸干孔內液體,溫育過程中不要讓微孔干燥。
3)消除底板殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4)底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。
5)避免試劑盒標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6)任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體,避免影響試劑中的生物活性。
7)平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
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