摘要：髓過氧化物酶(MPO)是一種過氧化物酶，由17號染色體上的MPO基因編碼。MPO在中性粒細胞（白血球的一種亞型）中表達得最多，并產生次氯酸以進行抗菌活動，包括次氯酸，其鈉鹽是漂白劑中的化學物質。它是一種溶酶體蛋白，儲存在中性粒細胞的嗜氮顆粒中，并在脫顆粒時釋放到細胞外空間。150kDa的MPO蛋白是一個陽離子異四聚體，由兩條15kDa的輕鏈和兩條重量可變的糖基化重鏈組成，與一個修復性血紅素基團結合，排列成異二聚體。

大鼠髓過氧化物酶(MPO)科研ELISA試劑盒實驗前的準備：

1） 確定試劑盒在有效期內

2） 仔細閱讀說明書，按說明書確定所有試劑齊全（數量、體積）

3） 提前準備好所有實驗額外所需的設備（如離心機、37℃恒溫箱、高精度加樣器及槍頭、酶標儀等）

4） 標本制備要規范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。短期內無法實驗者注意低溫保存。根據檢測標本數量確定所需試劑的量

5） 按說明書將所有試劑平衡至室溫，配制所需試劑。嚴格按照說明書進行實驗步驟。

注意：我司ELISA試劑盒中每個試劑都有穩定體系的作用，請嚴格按照說明書操作

常見樣本處理及要求：大鼠髓過氧化物酶(MPO)科研ELISA試劑盒

【血清樣本】：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時或 4℃過夜，然后 1000×g 離心 20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

注意事項：收集血液樣本應避免溶血，因為紅細胞在溶解時會釋放具有過氧化物酶活性的物質，這種情況下，ELISA實驗中將會出現非特異性顯色反應，導致檢測結果不準確，出現假陽性結果。另外，樣本還應避免細菌污染，因為細菌可能含有內源性HRP，也會導致檢測結果不準確。

【血漿樣本】：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

注意事項：檢測前請仔細閱讀ELISA試劑盒說明書，查看該試劑盒針對抗凝劑是否有特殊要求。

【組織勻漿】：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織jian碎。將jian碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

【細胞培養物上清】：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

【樣品保存】：樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個月內檢測），或-80℃（6個月內檢測），避免反復凍融，標本溶血會影響最后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。