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應用領域 | 醫療衛生,環保,生物產業 |
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微圖案
控制細胞的 2D 形狀
微圖案
細胞在具有預定義幾何特征的粘附微米大小區域圖案的基底中培養。當在其上培養時,細胞會特異性地粘附在圖案區域,例如獲得圖案的幾何形狀。
細胞培養支持物使用抗氧化抗粘附 聚合物 進行共價結合的表面化學處理。與與載玻片具有相同類型共價鍵的經典聚合物相比,對氧化的敏感性較低。電鍍后,您可以將細胞保持在圖案中長達 2 周。未使用的基材可儲存長達 6 個月。
> 不同的圖案形狀和尺寸(線條、正方形、三角形、矩形、網格等)
> 定制的形狀和尺寸
> 適用于任何細胞培養基質(從培養皿到 384 孔板)——從單細胞到高通量和高內涵篩選分析
> 與高分辨率光學顯微鏡系統兼容
動態微圖案
Dynamic Explorer 結合了 4Dcell 的微圖案技術和點擊化學,以誘導細胞從預定義的幾何形狀遷移。
細胞被播種在微圖案基板上,并以非常高的分辨率專門粘附在細胞粘附區域上。細胞周圍的區域起初是非粘性的,但可以隨時“打開"以將細胞從它們的圖案中釋放出來。
與標準微圖案一樣,可以將細胞圖案化為定制的形狀和尺寸。
> 抗粘聚合物
與載玻片共價和靜電鍵合,穩定長達 3 個月
聚合物可以通過點擊化學反應變得具有粘性
正方形微圖案培養皿 微圖案孔中神經網絡
細胞形狀控制和標準化、細胞器定位表征、細胞成熟和分化、遷移區域限制、細胞重編程、蛋白質微模式等。
寬度為 100 到 10 ?m 的 HeLa 細胞
熒光標記的纖維蛋白原——Alexa Fluor 488
探索應用示例
> 肝小管試驗:改進的肝細胞分化模型
> 井中的神經網絡:神經元連接的控制
> 附加球體測定:改進球體的操作和觀察
> 2D 心肌細胞成熟試驗:功能性 IPSc 誘導的心肌細胞纖維
> 心肌細胞成熟試驗:功能性 IPSc 誘導的心肌細胞纖維
> 細胞遷移測定:遷移 過程中發生的機制分析
> 細胞極化:細胞 形狀和組織的標準化
> 共培養測定:通過點擊化學技術分析細胞-細胞接觸
> 受挫的吞噬作用:機制的表征
> 片狀偽足和絲狀偽足檢測:分析膜突出期間發生的事件
> 活細胞成像:通過延時顯微鏡觀察細胞
> 巨噬細胞極化測定:通過細胞形狀調節巨噬細胞表型
> 微管依賴性運輸測定:細胞骨架組織的細胞限制
> 細胞器定位分析:統計細胞器在細胞中的定位
> 初級纖毛測定:纖毛發生調控的細胞形狀控制
> 骨骼肌細胞測定:排列、組織和形狀標準化
> 抗粘聚合物
與載玻片共價和靜電鍵合,穩定長達 3 個月
聚合物可以通過點擊化學反應變得具有粘性
Dynamic Explorer 結合了 4Dcell 的微圖案技術和點擊化學,以誘導細胞從預定義的幾何形狀遷移。
細胞被播種在微圖案基板上,并以非常高的分辨率專門粘附在細胞粘附區域上。細胞周圍的區域起初是非粘性的,但可以隨時“打開"以將細胞從它們的圖案中釋放出來。
動態微圖案技術
在使用動態微圖案的典型實驗中,可以使用實時成像工具或通過在不同時間點獲取圖像來實時監測細胞遷移。然后對圖像進行處理和分析,以確定細胞占據的基板面積作為時間的函數。
通過測量不同時間點擴散細胞所占的面積,可以量化從圓形圖案中的細胞遷移。
先,使用 imageJ 內置的“滾動球"算法從圖像中減去背景。這允許增強細胞和背景之間的對比度并糾正不均勻的照明。
然后,使用“ColorToGray"CellProfiler 模塊將圖像轉換為灰度圖像。然后將“平滑"模塊應用于灰度圖像以去除偽影。
接下來,'IdentifyPrimaryObjects 和“MeasureImageAreaOccupied"模塊相繼應用。
個將圖像上的特征分為兩類:對象和背景,其中單元格對應于對象。后者測量圖像上先前計算的對象所占據的面積。
探索應用示例
> 如何使用圖像處理通過 4DCELL 測定法測量圓盤狀細胞遷移?
> 如何使用圖像分析測量傷口隨時間的閉合情況?
CellProfiler 管道中使用的模塊序列,用于測量圖像上單元格占用的區域
本例中,單元格在原圖上所占的面積為 6%
在三個時間點采集底物圖像:在用試劑觸發細胞遷移后立即、4 小時、8 小時和 24 小時后。還提供了未經處理的陰性對照。
使用 CellProfiler 計算單元占用的面積
技術概述
> 使用微模式模擬心肌收縮
> 由微圖案蛋白質底物引導的細胞遷移
> 神經組織工程:基質剛度調節神經元網絡的形成和活動
> 回顧 – 微圖案
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