N 端腦鈉肽前體測(cè)定試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法） 說(shuō)明書(shū) IVD

【產(chǎn)品名稱(chēng)】 通用名稱(chēng): N 端腦鈉肽前體測(cè)定試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法） 英文名稱(chēng): VIDAS NT-proBNP2 (PBN2)

【包裝規(guī)格】 60 測(cè)試/盒

【預(yù)期用途】 本產(chǎn)品用于測(cè)定人血清或血漿（肝素鋰和肝素鈉）中腦鈉肽的 N 末端片段水平。 N 端腦鈉肽前體測(cè)定試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法）是一種在 VIDAS 系列儀器上應(yīng)用的自動(dòng)定量檢測(cè)， 采用 ELFA（酶聯(lián)免疫熒光法）技術(shù)用于測(cè)定人血清或血漿（肝素鋰和肝素鈉）中腦鈉肽的 N 末端片段 水平。VIDAS NT-proBNP2（PBN2）檢測(cè)被用作疑似心力衰竭的輔助診斷方法。 摘要和說(shuō)明 心力衰竭（HF）是一種復(fù)雜的臨床綜合癥，發(fā)生這種癥狀時(shí)，心臟的泵血功能不足以滿(mǎn)足機(jī)體新陳 代謝的需要。最常見(jiàn)的癥狀是呼吸短促、疲勞、心動(dòng)過(guò)速和水腫（1）。鈉肽—ANP（心房鈉肽）、BNP （腦鈉肽）和 CNP（C 型鈉肽），是心臟（ANP 和 BNP）或血管內(nèi)皮細(xì)胞（CNP）對(duì)血流動(dòng)力學(xué)壓力 做出反應(yīng)所釋放的神經(jīng)激素,以調(diào)節(jié)血容量?jī)?nèi)穩(wěn)態(tài)：血管舒張（拮抗腎素-血管緊張素系統(tǒng)）、 尿鈉排泄 （腎臟分泌鈉增多）以及利尿（2）。由于血容量擴(kuò)張或血壓超負(fù)荷引起的心肌內(nèi)壁壓力增加，會(huì)激活心 肌細(xì)胞中 BNP 基因,產(chǎn)生前體分子 proBNP。該前體分子經(jīng)進(jìn)一步裂解后釋放出具有生物活性的 C-末端片 段 BNP 以及非活性的 N-末端片段 NT-proBNP（2）。BNP 和 NT-proBNP 在血液中的濃度具有很高的相 關(guān)性，但由于半衰期不同（NT-proBNP 為 120 分鐘，BNP 為 60 分鐘），NT-proBNP 的水平比 BNP 要 高（2）。腎臟能夠等量清除這兩種分子，而 BNP 還會(huì)被鈉肽受體或神經(jīng)內(nèi)肽酶（蛋白水解）清除 （3）。NT-proBNP 的水平升高與心室功能不全以及心力衰竭嚴(yán)重程度有關(guān)（4），NT-proBNP 還可用于 檢測(cè)輕度心力衰竭（5）以及射血分?jǐn)?shù)保留的心力衰竭（6）。 B-型鈉肽被專(zhuān)業(yè)指南推薦用于對(duì)急性呼吸困難和疑似急性心力衰竭患者尤其是臨床無(wú)法確診的患者 進(jìn)行診斷評(píng)估（1, 7）。研究表明，在急診科疑似心力衰竭患者診斷策略中納入 NT-proBNP 檢測(cè)，能夠 有效縮短住院時(shí)間并降低花費(fèi)（8,9）。ICON 研究已經(jīng)確定了 NT-proBNP 在診斷急性心力衰竭方面的單 個(gè)排除臨界值和多個(gè)基于年齡的納入臨界值（10）。進(jìn)行 NT-proBNP 鑒別診斷也具有重要的臨床意義， 因?yàn)?NT-proBNP 的水平在其他影響心室功能的情況下也會(huì)升高，例如：肺栓塞、高血壓、心瓣膜病、心 肌病、心律失常、重癥疾病（例如：膿毒血癥）、貧血和中風(fēng)（11）。 初診時(shí)，NT-proBNP 檢測(cè)在引導(dǎo)無(wú)癥狀性慢性心力衰竭患者轉(zhuǎn)診專(zhuān)業(yè)科室方面尤為重要，因?yàn)樵擁?xiàng) 檢測(cè)可排除疑似左心室收縮功能不全（12）。NT-proBNP 在各種臨床情況中均有各自的預(yù)后值，包括伴 隨或不伴隨急性心力衰竭的急性呼吸困難（13）、慢性心力衰竭（14）、穩(wěn)定和不穩(wěn)定型缺血性心臟病 （15）。NT-proBNP 對(duì)肌鈣蛋白水平正常的急性冠狀動(dòng)脈綜合征的預(yù)后價(jià)值越來(lái)越高（16）。NTproBNP 在急性非穩(wěn)定性心力衰竭的住院患者監(jiān)測(cè)（17）和慢性心力衰竭的治療指導(dǎo)方面（18）可作為 一種有效指標(biāo)。 VIDAS NT-proBNP2 檢測(cè)包含兩個(gè)單克隆抗體，這兩個(gè)抗體可以識(shí)別位于 proBNP（1-108）N 末端 部分（1-76）的表位。

【檢驗(yàn)原理】 一步夾心免疫法結(jié)合終點(diǎn)法熒光檢測(cè)（ELFA）。 固相管（SPR® ）作為固相和加樣器。試劑為即用型，預(yù)先分注到密封的試劑條中。 所有測(cè)定步驟均由儀器自動(dòng)完成。樣品轉(zhuǎn)移到含堿性磷酸酶標(biāo)記的抗-NT-proBNP 抗體（結(jié)合物）的 小孔中。樣品/結(jié)合物混合物在 SPR 中多次循環(huán)進(jìn)出，使抗原與固定在 SPR 內(nèi)壁和結(jié)合物上的免疫球蛋 白相結(jié)合從而形成夾心。 通過(guò)洗滌步驟，去除未結(jié)合部分。 N 端腦鈉肽前體測(cè)定試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法） 版本號(hào) 9301622 D - 2015/01 2 然后進(jìn)行兩次檢測(cè)。在每一次檢測(cè)中，底物（4-甲基傘形酮磷酸酯）在 SPR 中進(jìn)出循環(huán)。結(jié)合物中 的酶催化底物水解成可在 450 nm 下測(cè)定其熒光的熒光產(chǎn)物（4-甲基傘形酮）。熒光強(qiáng)度與樣品中的免疫 球蛋白濃度成正比。 檢測(cè)結(jié)束后，儀器根據(jù)兩個(gè)檢測(cè)步驟對(duì)應(yīng)的兩條定標(biāo)曲線(xiàn)，通過(guò)熒光閾值確定每個(gè)樣品所用的定標(biāo)曲 線(xiàn)，自動(dòng)計(jì)算結(jié)果。然后，打印結(jié)果。

【主要組成成分】 試劑盒組成 PBN2 試劑條，60 條 STR 即用型。 PBN2 固相管，60 個(gè) 2 x 30 SPR® 即用型。小鼠單克隆抗- NT-proBNP 抗體包被的固相管(SPR)。 PBN2 質(zhì)控品： C1 質(zhì)控品 1 x 2 mL（液體） C2 質(zhì)控品 1 x 2 mL（液體） C1 C2 即用型。 PBS 緩沖液 pH 7.2 + 蛋白質(zhì)和化學(xué)穩(wěn)定劑 + 含有合成 NTproBNP 肽的防腐劑。 C1 質(zhì)控品濃度大約為 3000~4600 pg/mL，C2 質(zhì) 控品濃度大約為 480~720 pg/mL，質(zhì)控品濃度具有批特異性，具體濃度 值詳見(jiàn) MLE 數(shù)據(jù)。 MLE 數(shù)據(jù)將顯示以 pg/mL 為單位的置信區(qū)間（ “質(zhì)控品 C1 劑量值范圍" 或“質(zhì)控品 C2 劑量值范圍"）。 PBN2 標(biāo)準(zhǔn)品： S1 標(biāo)準(zhǔn)品 2 x 2 mL（液體） S2 標(biāo)準(zhǔn)品 2 x 2 mL（液體） S1 S2 即用型。 PBS 緩沖液 pH 7.2 + 蛋白質(zhì)和化學(xué)穩(wěn)定劑 + 含有合成 NTproBNP 肽的防腐劑。 S1 標(biāo)準(zhǔn)品濃度大約為 6100~9200 pg/mL，S2 標(biāo) 準(zhǔn)品濃度大約為 250~450 pg/mL，標(biāo)準(zhǔn)品濃度具有批特異性，具體濃度 值詳見(jiàn) MLE 數(shù)據(jù)。 MLE 數(shù)據(jù)將顯示以 pg/mL 為單位的標(biāo)準(zhǔn)品濃度[“標(biāo)準(zhǔn)品（S1）劑量值"或 “標(biāo)準(zhǔn)品（S2）劑量值"]，同時(shí)顯示以“相對(duì)熒光值"表示的置信區(qū)間[“標(biāo)準(zhǔn) 品（S1）RFV 范圍"或“標(biāo)準(zhǔn)品（S2）RFV 范圍"]。 樣品稀釋液 1 x 2 mL R1 即用型。 PBS 緩沖液 pH 7.2 + 蛋白質(zhì)和化學(xué)穩(wěn)定劑 + 防腐劑。 校準(zhǔn)測(cè)試所需的出廠(chǎng)主數(shù)據(jù)規(guī)格書(shū)： • 試劑盒提供了 MLE 數(shù)據(jù)（主批次輸入） 或者 • 包裝盒標(biāo)簽上印有 MLE 條形碼 SPR SPR®內(nèi)壁，在生產(chǎn)過(guò)程中已經(jīng)采用小鼠單克隆抗-NT-proBNP 抗體對(duì)進(jìn)行包被。每個(gè) SPR 均采用 “PBN2"編碼進(jìn)行識(shí)別。使用時(shí)，從袋子中取出所需數(shù)目的 SPR 管后，請(qǐng)立即封袋保存。 試劑條 試劑條有 10 個(gè)小孔，采用已標(biāo)記箔材封口。標(biāo)簽包含一個(gè)條形碼，主要包括試驗(yàn)代碼、試劑盒批號(hào) 和有效期。加樣時(shí)，需將第 1 孔的箔材穿孔，以便加入樣品。每個(gè)試劑條的最后一個(gè)小孔是檢測(cè)孔，用 于熒光檢測(cè)。試劑條中部的小孔中包含了試驗(yàn)所需的各種試劑。 孔 試劑 1 樣品孔。 2 - 3 - 4 空白孔。 5 結(jié)合物：堿性磷酸酶標(biāo)記的綿羊單克隆抗-NT-proBNP 抗體+ 防腐劑（400 µL）。 6 -7 - 8 TRIS NaCl Tween（pH 7.3）+ 防腐劑（600 µL）。 9 空白孔。 10 含底物的讀取孔：4-甲基傘形酮磷酸鹽（0.6 mmol/L）+ 二乙醇胺（DEA*）（0.62 N 端腦鈉肽前體測(cè)定試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法） 版本號(hào) 9301622 D - 2015/01 3 mmol/L 或 6.6%. pH 9.2）+ 1 g/L 疊氮鈉（300µL）。 *警示詞：危險(xiǎn) 危害： H318：造成嚴(yán)重眼部刺激。 預(yù)防措施： P280：配戴防護(hù)手套/護(hù)目鏡/面罩。 P305+P351+P338：如入眼：用清水小心沖洗數(shù)分鐘。如果配戴隱形眼鏡并方便摘除，摘除隱形眼 鏡后繼續(xù)沖洗。 詳情參見(jiàn)“材料安全性數(shù)據(jù)表"。 試驗(yàn)所需的但試劑盒未提供的材料 - 用于分裝 200µL 液體的帶一次性吸頭的加樣槍。 - 無(wú)滑石粉的一次性手套。 - 對(duì)于其他具體材料和一次性耗材，請(qǐng)參見(jiàn)儀器用戶(hù)手冊(cè)。 - VIDAS 系列儀器。

【儲(chǔ)存條件及有效期】 儲(chǔ)存條件 • 在 2～8℃，有效期 12 個(gè)月。 • 禁止冷凍。 • 將所有未使用的試劑存放在 2-8℃下。 • 打開(kāi)試劑盒后，檢查確認(rèn) SPR 袋子正確密封且無(wú)損壞。如果不合格，禁止使用 SPRs。 • 使用后在內(nèi)部放置干燥劑并將袋子仔細(xì)密封以保持 SPRs 的穩(wěn)定性，并將整個(gè)試劑盒放回至 2-8℃條件 下。 • 若按照上述規(guī)定條件貯藏，所有組分在有效期內(nèi)保持穩(wěn)定。 生產(chǎn)日期：詳見(jiàn)外包盒標(biāo)簽。 失效日期：詳見(jiàn)外包盒標(biāo)簽。

【適用儀器】 VIDAS，mini VIDAS，VIDAS 3