EDTA脫鈣液

產(chǎn)品貨號：E1135

產(chǎn)品規(guī)格：100ml/500ml

產(chǎn)品說明：

一些組織內(nèi)含有骨質(zhì)或鈣化灶時，含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因為鈣和石蠟之間的密度不同，較難切除完整的切片。對含鈣組織最好固定之后，再進行脫鈣或二者同時進行。然后進行下游的實驗，如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。用于脫鈣的試劑很多，脫鈣劑包括有機酸、無機酸、乙二胺四乙酸（EDTA）以及電解法脫鈣。?

EDTA是一種相對較好的螯合脫鈣劑，對組織結(jié)構(gòu)影響最小，可以較好的保存組織的某些酶類，經(jīng)EDTA脫鈣后的組織可以進行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢，一般脫需要數(shù)周至數(shù)月。?

EDTA脫鈣液優(yōu)點：①經(jīng)EDTA脫鈣的組織染色結(jié)果好；②對組織的結(jié)構(gòu)損害??；③用化學(xué)方法測試可以確定脫鈣的終點。?

缺點：①脫鈣速度很慢，不適合常規(guī)標(biāo)本脫鈣使用；②脫鈣后組織會稍微變硬。

 產(chǎn)品組成：

主要成分：主要由EDTA、磷酸鹽等組成，用NaOH溶液調(diào)pH值為7.2。

自備材料：?

1. PBS。

2. 蒸餾水。

3. 加熱裝置或微波爐。

操作步驟(僅供參考)：

1. 骨組織脫鈣時，取材不易過厚，一般大約5mm。?

2. 組織固定后，用PBS清洗3次，每次20min。

3. 組織用蒸餾水洗清洗3次，每次20min。?

4. 組織轉(zhuǎn)移至20~30倍體積的EDTA脫鈣液中，脫鈣10～30天或更長時間。如果想加快脫鈣速度，可以置于37℃進行脫鈣。如果必要，更換新的EDTA脫鈣液繼續(xù)脫鈣，多數(shù)組織脫鈣2周～3個月即可，每周更換一次，直至終點。亦可采用微波快速脫鈣法：微波爐設(shè)在200W左右的檔位，每次加熱5min，依據(jù)組織厚度和密度重復(fù)3～5min，中間間隔3～5min。?

5. 用蒸餾水沖洗數(shù)次。?

6. 常規(guī)脫水、包埋。

注意事項：

1. 厚度5mm的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣10~30天即可。?

2. 適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度，一般不應(yīng)超過37～40℃，溫度過高容易使骨組織造成松散解體，尤其不可大于60℃。脫鈣應(yīng)*，防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應(yīng)控制在不影響組織切片的同時盡量縮短脫鈣時間，以免脫鈣過長引起組織損害。?

3. 脫鈣用具避免使用金屬容器，盡量使用玻璃容器。?

4. 骨組織脫鈣應(yīng)先固定后脫鈣或脫鈣固定同時進行，不應(yīng)先脫鈣后固定，以便減少組織的損傷程度。?

5. 每隔一段時間檢測一次脫鈣程度，避免脫鈣過度，脫鈣過度會增加組織的損傷程度，影響染色結(jié)果。?

6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期： 12個月有效。