詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腸動脈 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8326 |
細胞簡介:
兔腸動脈平滑肌分離自腸系膜動脈組織;腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內大的微生態系統。腸系膜動脈由背大動脈發出的走行在腸系膜內,分布于消化管的動脈。分成腸系膜上動脈和腸系膜下動脈。前者主要分布于小腸左側,后者分布于結腸、大腸、泄殖腔等處。腸動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。
方法簡介:
實驗室分離的兔腸動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔腸動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔腸動脈平滑肌體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
總(T-GSH)/氧化型(GSSG)測定試劑盒(微板法)
酸性0酸酶(ACP)測定試劑盒(微板法)
紅細胞NADH高鐵血紅蛋白還原酶測定試劑盒(比色法)
銅-ATP酶(Cu-ATPase)測定試劑盒(比色法)
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Human sarcomeric - actinin alpha (SM Actinin- a) ELISA Kit 人橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )試劑盒
Rabbitsolubleclusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 兔子可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforApoA1(Humanai-apolipoproteinA1aibody)ELISAKit人抗載脂蛋白抗體A1
血清/血漿總膽汁酸酶循環比色法定量試劑盒20次
PorcineIestinalefoilfactor,ITFELISAKit豬腸三葉因子(ITF)試劑盒
RPUSD1蛋白抗體
細胞膜蛋白Derlin抗體
KLRB1F重組小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 蛋白 Protein
RNA結合基元蛋白24(RBM24)重組蛋白 Recombinant RNA Binding Motif Protein 24 (RBM24)
GIF重組人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白 (His 標簽) Protein
BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標簽)
SELP Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 (His 標簽)
MMP-9(matrix metalloproteinase 9 0.5mgMMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質金屬蛋白酶-9(抗原)
BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標簽)
IL1B重組食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白 Protein
HGF Protein Mouse 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 標簽)
WFDC2重組人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (His 標簽) Protein
兔腸動脈平滑肌細胞大鼠β防御素2(DEFB2)試劑盒 ,英文名: DEFB2 ELISA Kit
Rabbit immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit 兔子免疫球蛋白G(IgG)試劑盒
ELISA 小鼠骨保護素(mouse OPG) 進口分裝
CLIAKitforIL-11ELISAKit大鼠白介素11
通用型馬原蟲性腦脊髓(EquineProtozoaMyeloencephalitis)試劑盒20次
ELISAKitVEGFR-1大鼠血管內皮細胞生長因子受體1
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行