化工儀器網
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腎 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X8433 |
細胞簡介：
兔腎足突分離自腎組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。足細胞（podocyte）即腎小囊臟層上皮細胞，它附著于腎小球基底膜（GBM）的外側，連同GBM和毛細血管內皮一起構成了腎小球血液濾過屏障。足細胞特殊的解剖位置，使得其體內研究較為困難；又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞，體外培養的原代細胞不能增殖。足細胞呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，又稱足突（FP），呈指狀交叉復蓋于GBM外表面，并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分，IV型膠原和纖維連接蛋白（FN）；在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質金屬蛋白酶（MMPs）和組織蛋白酶，從而在GBM的代謝平衡中發揮重要作用。足細胞之間鄰近的足突相互交替，形成了許多30-40nm的裂孔，孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜，即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統的后屏障，對于維持腎小球濾過屏障結構與功能完整性發揮關鍵作用。
方法簡介：
實驗室分離的兔腎足突采用機械研磨過不同孔徑不銹鋼網篩結合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的兔腎足突經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔腎足突體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
小鼠巨噬細胞游走抑制因子 英文名稱： macrophage migration inhibitory factor 英文縮寫： MIF
小鼠巨噬細胞性蛋白-1 英文名稱： Macrophage Inflammatory protein 1 英文縮寫： MIP-1
小鼠巨噬細胞性蛋白-2 英文名稱： Macrophage Inflammatory protein 2 英文縮寫： MIP-2
小鼠巨噬細胞性蛋白-3α 英文名稱： Macrophage Inflammatory protein 3α 英文縮寫： MIP-3α
EPG5蛋白抗體
骨形態發生蛋白11抗體
RBP4重組小鼠 RBP4 蛋白 Protein
BKCa channels(calcium-activated potassium channel 0.5mgBKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活通道蛋白
VDR重組人 VDR / NR1I1 蛋白 Protein
CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標簽)
CLEC14A Protein Rat 重組僀?僀
BKCa channels(calcium-activated potassium channel 0.5mgBKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活通道蛋白
CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標簽)
RBP4重組小鼠 RBP4 蛋白 Protein
CLEC14A Protein Rat 重組大鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (Fc 標簽)
VDR重組人 VDR / NR1I1 蛋白 Protein
小鼠酶(CAT)ELISA 試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
Rat immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒
humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)pcr檢測試劑盒分裝
HumanAi-phosphatidylserineaibody,APSA試劑盒人抗0脂酰絲抗體(APSA)試劑盒規格：96T/48T
植物細胞可溶性總核蛋白粗提制備試劑盒20次
HumaypeⅡcollagenhelicalpeptide，HELIX-ⅡELISAKit人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)試劑盒規格：96T/48T
兔腎足突細胞大鼠凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)試劑盒 ，英文名： LOX1 ELISA Kit
Mouse platelet membrane glycoprotein B II (GP- II III a B III a/CD41+CD6 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD6
RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforGHELISAKit大鼠釋放激素
細胞酶3(PON3)活性熒光定量試劑盒
Ratthioredoxieductase,xRELISAKit大鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒規格：96T/48T
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
化工儀器網