化工儀器網
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
眼球 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8453 |
細胞簡介：
兔小梁網分離自眼球組織；小梁網由角膜基質纖維、后界膜和角膜內皮向后擴展而成，覆蓋在鞏膜靜脈竇的內側。小梁網細胞在眼內壓調節中起著關鍵作用；小梁網細胞內有特定的神經遞質和神經肽受體，其中包括腎上腺素、乙酰和神經肽Y。青光眼是由于眼內壓力升高而造成的一種逆致盲眼病，小梁網細胞的體外培養是青光眼病因學研究的重要手段之一。在小梁網細胞中，一長串的血管活性多肽和生長因子能夠觸發細胞內信號傳導機制，小梁網細胞可合成不同類型的細胞外基質蛋白以及金屬蛋白酶。形態學觀察可見，剛從組織塊長出的原代細胞，形態各異，多數呈星狀或不規則形。細胞有胞突，核橢圓形，胞體肥大，胞漿豐富，且可見吞噬顆粒。隨著細胞的增生及相互融合為單層，細胞的形態趨于一致。胞漿的色素顆粒及胞突消失，排列緊密呈類似上皮細胞的扁橢圓形或不規則形。胞體透亮，包膜清晰。
方法簡介：
實驗室分離的兔小梁網采用組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的兔小梁網經NSE(神經元特異性烯醇化酶)免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：梭形、多角形
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔小梁網體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
豚鼠白介素6(IL-6)試劑盒
豚鼠白介素4(IL-4)試劑盒
豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒
豚鼠白介素12(IL-12/P70)試劑盒
前列腺素F2a/PGF2 α抗體
轉錄調節因子C/EBPδ抗體
CA4重組小鼠 Carbonic Anhydrase IV / Car4 蛋白 Protein
CCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12 0.5mgCCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12) 單核細胞趨化蛋白5抗原
UBE2M重組人 UBE2M 蛋白 Protein
FST Protein Human 重組人 Follistatin / FST (FS288) 蛋白
CD8A Protein Rat 重組大鼠 CD8A / Lyt2 蛋白 (Fc 標僀?
CCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12 0.5mgCCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12) 單核細胞趨化蛋白5抗原
FST Protein Human 重組人 Follistatin / FST (FS288) 蛋白
CA4重組小鼠 Carbonic Anhydrase IV / Car4 蛋白 Protein
CD8A Protein Rat 重組大鼠 CD8A / Lyt2 蛋白 (Fc 標簽)
UBE2M重組人 UBE2M 蛋白 Protein
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat prostaglandin E1 (PGE1) ELISA Kit 大鼠前列腺素E1(PGE1)試劑盒
Humancirculatingimmunecomplex,CICELISAKit 人循環免疫復合物(CIC)pcr檢測試劑盒分裝
Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2試劑盒人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)試劑盒規格：96T/48T
植物總RNA化試劑盒(高多糖/酚)20次
HumanSurfactaProteinA，SP-AELISAKit人表面活性蛋白A(SP-A)試劑盒規格：96T/48T
兔小梁網細胞大鼠血小板反應蛋白(THBS1)試劑盒 ，英文名： THBS1 ELISA Kit
Mouse coisol (Coisol) ELISA Kit 小鼠(Coisol)試劑盒
MouseUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 小鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforHumanchemerinELISAKit人chemerin
細胞CHK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitsIgA大鼠分泌型免疫球蛋白A
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
化工儀器網