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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
胰腺 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X8472 |
細胞簡介：
兔胰腺上皮分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰腺干細胞在發育上被認為分離自內胚層胰腺上皮，在隨后的胰腺發育過程中，胰腺干細胞分化為胰島細胞（α、β、δ、PP細胞）、導管上皮細胞以及腺泡細胞。胰腺組織中還存在大量的間充質來源的細胞，包括成纖維細胞、血管內皮細胞、血管平滑肌細胞以及星形細胞，其中以成纖維細胞占主要部分。要離體分離培養獲得胰腺上皮細胞就要排除間充質來源的細胞，尤其是成纖維細胞。目前常用的去除成纖維細胞方法有機械刮除法、消化以及膠原酶消化法等，胰腺上皮細胞的病變與急慢性胰腺炎的發生具有重大意義。
方法簡介：
實驗室分離的兔胰腺上皮采用膠原酶分次消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的兔胰腺上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔胰腺上皮體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISAKit ELISA
兔p53(p53)ELISAKit ELISA
兔Bcl-2相關X蛋白(BAX)ELISAKit ELISA
兔(ADR)ELISAKit ELISA
B7-H4抗體
輔酶Q10B抗體
CLEC6A重組小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 Protein
CD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原 0.5mgCD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原)
CCDC134重組人 CCDC134 蛋白 Protein
HNMT Protein Human 重組人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 標簽)
CD14 Protein Rat 重組大鼠 CD14 蛋僀
CD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原 0.5mgCD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原)
HNMT Protein Human 重組人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 標簽)
CLEC6A重組小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 Protein
CD14 Protein Rat 重組大鼠 CD14 蛋白
CCDC134重組人 CCDC134 蛋白 Protein
小鼠IgG Fc片段(IgGFcγ)pcr檢測試劑盒
Rat advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 大鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)試劑盒
HumahromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 人血栓素B2(TXB2)pcr檢測試劑盒分裝
HumanCollagenaseTypeII試劑盒人膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒規格：96T/48T
組織ABL1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumaeceptorⅢfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅢELISAKitGFc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)試劑盒規格：96T/48T
兔胰腺上皮細胞大鼠輕肽鐵蛋白(FTL)試劑盒 ，英文名： FTL ELISA Kit
Mouse angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 小鼠血管生成素1(ANG-1)試劑盒
Ratprostatespecificaigen,PSAELISAKit 大鼠前列腺特異性抗原(PSA)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforGSH-Pxkit(human)人過氧化物酶試劑盒
細胞沉默調節蛋白3(SI3)活性比色法定量試劑盒20次
Ratypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit大鼠原激活肽(TAP)試劑盒規格：96T/48T
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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