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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
直腸 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X8481 |
細胞簡介：
兔直腸黏膜上皮分離自直腸組織；直腸為大腸的未段，位于小骨盆內。上端平第3骶椎處接續乙狀結腸，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過盆膈，下端以門而終。直腸上端的大小似結腸，其下端擴大成直腸壺腹，是糞便排出前的暫存部位，下端變細接管。直腸在盆腔內的位置與骶椎腹面關系密切，與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈，來自髂內動脈的直腸中動脈和來自髂內動脈的直腸下動脈。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障，持續暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。
方法簡介：
實驗室分離的兔直腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的兔直腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔直腸黏膜上皮體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
中文名稱 方法 規格
人抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit ELISA.
人抗單核細胞抗體(AMA)ELISAKit ELISA.
人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISAKit ELISA.
p53結合蛋白3抗體
顆粒酶A抗體
SERPINF2重組小鼠 SerpinF2 蛋白 (His 標簽) Protein
CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4 0.5mlCDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴性激酶4(抗原)
HOXA1重組人 HOXA1 蛋白 (His 標簽) Protein
AKR1B1 Protein Human 重組人 AKR1B1 蛋白 (His 標簽)
SFRP4 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP4 蛋白 (His 標簽)
CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4 0.5mlCDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴性激酶4(抗原)
AKR1B1 Protein Human 重組人 AKR1B1 蛋白 (His 標簽)
SERPINF2重組小鼠 SerpinF2 蛋白 (His 標簽) Protein
SFRP4 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP4 蛋白 (His 標簽)
HOXA1重組人 HOXA1 蛋白 (His 標簽) Protein
豬白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒
Human ai IVIgG aibody ELISA Kit 人抗IVIgG抗體試劑盒
Porcineiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit 豬細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒分裝
CLIAKitforALB(Humanmicroalbunminuria)ELISAKit人尿微量白蛋白
血液(UROKINASE)活性熒光定量試劑盒20次
MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISAKit小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)試劑盒
兔直腸黏膜上皮細胞兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒
Rat angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 大鼠血管生成素2(ANG-2)試劑盒
HumanAi-mitochondriaaoaibodies,AMAELISAKit 人抗線粒體抗體(AMA)試劑盒分裝
Humancytotoxin,CTX試劑盒人細胞毒素(CTX)試劑盒
組織IKKα激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanplasminogenactivator，PLGAELISAKit人纖溶酶原激活劑(PLGA)試劑盒
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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