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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
胎盤 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8484 |
細胞簡介：
兔滋養層干分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育，依靠胎盤從母體取得營養，而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。滋養層干細胞是胎盤組織細胞的祖細胞，與胚胎著床和胎盤的形成密切相關。胚胎著床和胎盤形成是母體與胎兒建立聯系的關鍵時期，此時期滋養層細胞增殖速度快，滋養層干細胞自我更新和分化旺盛，與多種妊娠相關疾病的發生、發展及其增殖、功能調節的失常有密切關系。在哺乳動物胚胎發育過程中，胚胎細胞第一次分化形成內細胞團和滋養外胚層。滋養層干細胞是胎盤細胞的前體細胞，在胎盤發育中有重要作用。
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
實驗室分離的兔滋養層干采用囊胚組織貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的兔滋養層經HLA-E(白細胞抗原)免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔滋養層干體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
兔子上腺髓質素(ADM)試劑盒
兔子神經營養因子4(-4)試劑盒
兔子神經營養因子3(-3)試劑盒
兔子神經特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒
CD134抗體
上皮鈉通道β抗體
LDLR重組小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein
CEA(Carcinoembryonic Antigen 0.5mgCEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 人癌胚抗原抗原
ACOX1重組人 ACOX1 / aox 蛋白 Protein
GAPDH Protein Human 重組人 GAPDH 蛋白
ICOSLG Protein Mouse 重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標簽僀
CEA(Carcinoembryonic Antigen 0.5mgCEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 人癌胚抗原抗原
GAPDH Protein Human 重組人 GAPDH 蛋白
LDLR重組小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein
ICOSLG Protein Mouse 重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標簽)
ACOX1重組人 ACOX1 / aox 蛋白 Protein
小鼠白三烯E4(LTE4)pcr檢測試劑盒
Rat heat shock protein 40 (HSP-40) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒
HumanSeptokinase,SKELISAKit 人鏈激酶(SK)pcr檢測試劑盒分裝
Humancaenorhabditiselegansdeathgene,CED-3試劑盒人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)試劑盒規格：96T/48T
質粒/蛋白制備樣品內毒素濁度法定量試劑盒20次
HumansolubleP-selectin，sP-selectinELISAKit人可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒規格：96T/48T
兔滋養層干細胞大鼠基質金屬蛋白酶13(MMP13)試劑盒 ，英文名： MMP13 ELISA Kit
Mouse cathepsin K (cath-K) ELISA Kit 小鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒
RatvisfatinELISAKit 大鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforF1+2(Rabbitprothrombinfragme1+2)ELISAKit兔原片段F1+2
細胞結構型內皮細胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量試劑盒20次
Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISAKit大鼠受體(M-AChR)試劑盒規格：96T/48T
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