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傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿（瓶）內，再進行培養的過程。原理：細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，...

慢病毒構建并包裝后，以進行貼壁細胞或懸浮細胞的轉染。具體流程如下：1.對慢病毒基因進行改造，即敲除U3端的400bp的特定基因，使其逆轉錄和整合的能力，但保留產...

三種擴大貼壁細胞培養的方法：維持其在培養皿表面（2D）的生長狀態，進行傳代培養放大；進行貼壁細胞分離，隨后在發酵罐的3D培養中進行小試到大規模的逐級放大；采用含...

細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系獲得的具有特殊性質的細胞。因此，欲構建細胞株，首先需獲得穩定的細胞系。構建流程如下：1. 細胞培養（原核：大腸...

凡是來源于胚胎、組織器官及外周血，經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。人或動物體內（或胚胎組織）由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養...

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生...

酶聯免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結...

ChiRP（Chromatin Isolation by RNA Purification ）是一種檢測與RNA綁定的DNA和蛋白相互作用的方法。該方法是通過設...

研究DNA結合蛋白與其靶DNA之間相互作用的主要實驗手段之一。原理及流程如下：鏈親和素磁珠能夠與生物素標記DNA/蛋白復合物結合。在磁場下或通過離心使結合物與上...

RNA pull down實驗 檢測RNA結合蛋白與其靶RNA之間的相互作用。使用體外轉錄法標記生物素RNA探針，然后與胞漿蛋白提取液孵育，形成RNA-蛋白質復...

熒光素酶報告基因是指以熒光素（luciferin）為底物來檢測螢火蟲熒光素酶（fireflyluciferase）活性的一種報告系統。熒光素酶可以催化lucif...

CHIP-seq，指的是結合位點分析法，作用為研究體內蛋白質與DNA相互作用。染色質免疫共沉淀技術（Chromatin Immunoprecipitation，...

多肽合成采用逐步縮合定向法以得到具有特定氨基酸順序的多肽，把不需要反應的氨基羧基用基團保護起來，再進行連接反應，保證定向反應的順利進行。

現如今固相亞磷酰胺三酯法是普遍采用的DNA合成方法，具有高效，快速偶聯的優點。其基本原理是：將核苷酸單體按照3′→5′磷酸二酯鍵鏈接，使其具有天然DNA分子的全...

PCR芯片是經過對Q-PCR體系優化而開發的PCR檢測體系。克服了Q-PCR檢測基因表達數量少等不足之處，其同時可對多種基因進行研究，且可在更短的時間內得到更豐...

聚合酶鏈式反應是一種用于放大擴增特定的DNA的片段的分子生物學技術。

Northern Blot或稱RNA印跡，是通過測定樣品中的RNA以檢測基因表達的分子生物學操作。通過檢測細胞分化過程中或細胞在不同環境條件下特定基因的表達情況...

蛋白質印跡法（Western Blot）通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色，通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組...