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產品貨號	產品名稱	品牌
22980-5g	EDC	Pierce
21555-1g	DSS	Pierce

 

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EDC（1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽） Pierce一級代理

貨號：:  22980

描述

Thermo Scientific Pierce EDC是一種可與羧基和胺反應的零長度交聯劑。EDC先與羧基反應并形成胺反應性O-酰基脲脲中間體，該中間體與氨基迅速反應形成酰胺鍵并釋放出脲脲副產物。中間體在水溶液中不穩定，因此兩步偶聯過程依賴于N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）來穩定。不能與胺反應將導致中間體水解，羧基再生和釋放N-取代的尿素。副反應是N-酰基脲的形成，其通常限于位于蛋白質疏水區域的羧基。

 

Thermo Scientific No-Weigh產品是以預分裝的形式提供的特殊試劑。預稱重的包裝通過消除小瓶的重復打開和關閉來防止試劑隨時間的流逝和污染。這種形式可以每次使用新鮮的試劑瓶，從而避免了稱量少量試劑的麻煩，并減少了對試劑穩定性的擔憂。

 

EDC的特征：

 

• 反應性基團：碳二亞胺

• 反應目標：活化羧基與氨基（伯胺）結合

• 幾種共軛策略 -EDC與目標基團單獨反應或包括NHS或Sulfo-NHS以提高反應效率或穩定活性中間體，以便以后與胺反應

• 中性鍵-在羧基和胺之間形成中性酰胺鍵

• 水溶性試劑-直接添加在生理緩沖液中的反應

• 可溶性反應副產物 -易于洗滌可以與水或稀酸一起使用

• 高純度結晶試劑 -用于產生高質量的活化衍生物

 

EDC的特性

•分子式：C 8 H 17 N 3 ·HCl

•分子量：191.7

•間隔臂長度：0Å

• CAS號：25952-53-8

•反應性基團：碳二亞胺

•反應性：在pH 4.7–6.0（佳）下與羧基形成活性中間體，然后該中間體與伯胺反應

 

1-乙基-3- [3-二甲基氨基丙基]碳化二亞胺鹽酸鹽（EDC或EDAC）為零長度的交聯劑，用于將羧基偶聯到伯胺上。該交聯劑已用于多種應用中，例如在肽合成中形成酰胺鍵，將半抗原連接載體蛋白以形成免疫原，通過5'磷酸基團標記核酸并創建生物分子的胺反應性NHS-酯。EDC與羧基反應形成胺反應性O-acylisourea中間體。如果該中間體不遇到胺，它將水解并再生羧基。在N-羥基磺基琥珀酰亞胺（Sulfo-NHS）的存在下，EDC可用于將羧基轉化為可與胺反應的磺基-NHS酯。這是通過將EDC與含羧基分子混合并添加Sulfo-NHS來實現的。

 

應用：

•結合肽和蛋白質之間的羧基和氨基

•將半抗原偶聯免疫原性載體蛋白（例如，將肽與KLH連接）

•將肽抗原固定于親和純化抗體

•創建NHS活化，可與胺反應的標記化合物

•交聯蛋白質到羧基包覆的珠子或表面

•用胺反應性的NHS酯活化納米顆粒

•通過5'磷酸基團進行DNA標記（請參閱技術提示＃30）

 

產品參考：

交聯劑應用指南-搜索該產品的文獻參考

 

規格

生產線：       皮爾斯™

交聯劑類型：       異雙功能

貼標方法：    化學標簽

反應性部分：       碳二亞胺

溶解度：       水

墊片：    短

數量：    5克

 

內容及儲存

儲存在-20℃。隨附濕冰。

介紹

Thermo Scientific™EDC是一種與羧基和胺反應的零長度交聯劑。 EDC先與羧基反應

并形成可與胺反應的O-酰基異脲中間體，該中間體可與氨基快速反應形成酰胺鍵，

釋放異脲副產物（請參見“其他信息”部分）。中間體在水溶液中不穩定，

因此，兩步偶聯過程依賴于N-羥基琥珀酰亞胺來穩定化。1,2

胺將導致中間體水解，羧基再生并釋放N-取代的尿素。在旁邊

反應是形成N-酰基脲，通常限于羧基疏水基團中的羧基。

蛋白質1,3

使用EDC將半抗原與載體蛋白偶聯的步驟

所需材料

•載體蛋白：2mg牛血清白蛋白（BSA），卵清蛋白（OVA）或匙孔血藍蛋白（KLH）

•偶聯緩沖液：0.1M MES（2- [N-嗎啉代]乙烷磺酸），pH 4.5-5（產品編號28390）

•EDC：10毫克

•半抗原：1-2mg

•Thermo Scientific™Zeba™Spin脫鹽柱（產品編號89891）或其他帶有柱頭的凝膠過濾柱

5-6K分子量截止

程序

1.將EDC平衡室溫。

2.將2mg凍干的BSA，OVA或KLH加入200µL偶聯緩沖液中。如果使用Thermo Scientific™Imject™

載體蛋白，用超純水復溶。

3.在500µL偶聯緩沖液中溶解2mg的肽或半抗原，然后將其添加到200µL的載體蛋白中

解。

4.對于BSA或OVA偶聯，將10mg EDC溶于1mL超純水中，并立即添加100μL

溶液載體-肽溶液。對于KLH偶聯，將10mg EDC溶于1mL超純水中，然后

立即將50µL的該溶液添加到載體-肽溶液中。如果沉淀，進一步減少EDC的量

發生。

5.在室溫下反應2小時。

6.使用脫鹽柱純化結合物。如果將免疫原保存了幾天以上，請無菌過濾

結合并儲存在4°C或-20°C的無菌容器中。

 

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