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BIO-rad代理 北京華新康信生物科技有限公司

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產品列表：

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1653304 CASTING FRAME，M-P3    bio-rad

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1653308 INNER GLASS PLATE,5,M-P3      bio-rad

1863009 DG8 gaskets for ddPCR, includes 1 package of 24 gaskets     bio-rad

165-2089      0.1cm間距電擊杯 bio-rad

1652088 電擊杯    BIO-RAD

12007283      Bio-Plex Pro  Human Cytokine Screening Panel     Bio-rad

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Bio-Plex 趨化因子篩選檢測試劑盒

趨化因子( chemokines) 是一類對血細胞遷移和聚集有調節作用的小分子多肽, 趨化因子及其受體在腫瘤生長、轉移和免疫逃逸以及自身免疫疾病中中發揮重要作用。作為炎性微環境中的主要組分，趨化因子在調節腫瘤/免疫細胞和正常組織細胞的平衡中起重要作用。對于不同腫瘤生長、侵襲、轉移及免疫調節相關的趨化因子及其受體的研究也日益增多。選擇一款給力的多因子篩選工具，幫助您迅速出腫瘤免疫相關趨化因子調控網絡。

僅需 10-12.5 ul 樣本即可完成 30-40 種不同趨化因子的篩選

2-3 小時即可完成篩選實驗

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DNA 甲基化研究，進來了解一下～

DNA 甲基化（DNA methylation）是 DNA 修飾途徑之一，即在甲基轉移酶的催化下，DNA 的 CpG 兩個核苷酸的胞嘧啶被選擇性地添加甲基，形成 5－甲基胞嘧啶（5-mC）。目前有大量研究證實，DNA 甲基化異常往往會引起染色質結構、DNA 穩定性等發生改變，抑制相關基因轉錄調控導致疾病發生，如腫瘤、血管類疾病、神經紊亂等。DNA 甲基化狀態亦可作為疾病診斷、監測及預后的重要 Biomarker1，4，5，6。

小編粗略盤點了一下目前常用的幾種 DNA CpG 甲基化檢測方法，下面進入掃盲時刻：

亞硫酸氫鹽處理+測序（BSP）：經過亞硫酸氫鹽處理后，未發生甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變；通過 PCR 擴增目的片段，并對產物進行測序，將序列與未經處理的序列進行比較，判斷 CpG 位點是否發生甲基化。

甲基化特異性 PCR（MS-PCR）：在亞硫酸氫鹽處理后，使用分別針對甲基化和非甲基化的序列設計的引物開展 MS-PCR，用電泳檢測 MSP 擴增產物。若針對甲基化序列設計的引物能擴增出片段，則說明該檢測位點存在甲基化；反之則則說明該檢測位點不存在甲基化。

甲基化敏感性限制性內切酶法（MSRE）：基于甲基化敏感 Ⅱ 型限制性內切酶不能切割含有一個或多個甲基化切點序列的基本原理，酶切產物經電泳分離，探針雜交，掃描定量后得出原樣本中甲基化的比例。

甲基化敏感性高分辨率熔解曲線法（MS-HRM）：經亞硫酸氫鹽處理后，甲基化與未甲基化 DNA 存在序列差異，可通過熔解溫度及峰型的變化區分*甲基化、*非甲基化或雜合甲基化。

焦磷酸測序（Pyrosequencing）：基于引物延伸的焦磷酸測序技術，通過將鏈合成過程中釋放出的焦磷酸（PPi）轉化成光信號， 轉換成一個峰值，其高度與核苷酸數目成正比。經重亞硫酸鹽處理的序列可看作是 C>T SNP 位點。因此可憑借信號峰值高低來確定甲基化狀態。

熒光定量法（Methylight）：利用亞硫酸氫鹽處理 DNA 樣本，設計分別針對待測序列甲基化和非甲基化狀態的 Taqman 探針和引物進行熒光 PCR 擴增，以區分 CpG 甲基化和非甲基化狀態。

上述幾種方法各有優缺點，比如 BSP，結果可靠，度高，但需要大量的克隆，操作過程繁瑣；MSRE，需要找到合適的酶切位點，受轉化不*影響；MS-HRM，對儀器要求高，需要有 HRM 模塊的熒光定量 PCR 儀（Bio-Rad 定量儀器均有此功能）；Pyrosequencing，過程復雜。

除此之外，還有高通量檢測技術，如質譜、靶向測序、illumina450k、850k 芯片、Pacific Bioscience 的 SMRT 測序、Oxford Nanopore 測序等。

QX200 微滴式數字 PCR（ddPCR）技術以分子計數的方式實現對靶標核酸序列的定量而不依賴標準曲線，且檢測的靈敏度、重復性和準確性有很大提高。ddPCR 技術在癌癥分子標志物發現、病毒載量分析、傳染病研究、基因組結構變異及 NGS 文庫定量等方面得到廣泛應用。

 而在 DNA甲基化研究方面 ddPCR 靈敏度更高，能在高豐度非甲基化背景下檢測出甲基化序列，耐受前期處理帶來的 PCR 抑制物的干擾，提高靈敏度，而且還能準確定量。

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