GIBCO馬血清熱滅活

英文名：Heat-Inactivated Horse Serum

規格：500ML

貨號：26050-088

GIBCO馬血清熱滅活 通常作為補充成分添加在基礎培養基內使用。它能夠提供各種大分子蛋白，小分子量營養，水溶性成分的轉運蛋白，和其它一些細胞在體外所必需的成分，如激素和附著因子。血清可以結合或中和一些生長因子中的有毒成分，并提供培養基的緩沖能力。細胞培養時血清的添加依賴于基礎培養基的化學組成，培養細胞的類型，及所用的培養系統。

我們在提供細胞培養基、平衡鹽溶液、無血清培養基和試劑的同時，還提供高品質的血清。我們對血清制備進行全過程監管。從血清收集到zui終產品檢驗和內部稽核的每一個步驟，我們都采用設備和標準操作程序，以確保整個過程中每個環節的產品質量。對整個過程的控制可以保證產品的持續高品質，降低不同批次的差異。

處理：全部血清：收集的血液均在冷藏條件下處理。血清和血分離后立即將血清合并并冷凍。只有符合我們的檢測標準的血清才被接受作進一步處理。

熱滅活血清：熱滅活是在56℃水浴中嚴格控溫30分鐘。透析血清：用10,000截留分子量的透析膜在0.15M的NaCl中進行透析，直到葡萄糖水平低于5mg/dl(用鄰甲苯胺測試法檢驗)。γ射線照射血清：可按客戶要求對血清進行γ射線照射。通過γ射線照射以滅活各種動物血清(包括胎牛血清、新生牛血清、豬血清和馬血清)中的病毒和支原體的方法已經得到證實。研究證實照射劑量在30-45kGy為宜。血清在此照射后物理化學特性和細胞培養表現沒有變化。裝瓶：粗血清須通過一系列的過濾才成為成品。zui后的過濾步驟包括使用0.2um和0.1um的無菌過濾。胎牛血清須通過三次0.1um過濾，其他血清須通過0.2um過濾。zui終產品的質量控制：我們采取以下方法對每一批次的產品選取一定數量的樣品進行質量控制分析：

化學檢測：使用低溫凝固點的方法檢測滲透壓，以保證符合產品規范。我們每天使用國家標準的技術研究所標定的標準溶液對我們的滲透壓檢測儀器進行校準。同樣每天使用國家標準技術研究所標定的標準溶液對pH計進行校準。

使用電泳圖譜鑒定血清的整體性質。樣品被轉移到硝酸纖維素基質中，并在緩沖體系內遷移。條帶經染色、清潔、干燥后用密度儀進行掃描，以檢測白蛋白和球蛋白組分的相對濃度。為證實是否在適當的條件下進行采血和處理，使用修飾的Fleming方法對血紅蛋白進行分光光度檢測。

隨著動物年齡的增加，血清總蛋白含量也相應地提高。使用自動化的Biuret方法進行總血清蛋白的檢測，以確認動物年齡并驗證符合產品規范。使用色度計在不同波長下檢測樣品和Biuret試劑混合波的吸光度。自動計算結果后，與標準曲線比較，即可得到蛋白值(克/公升)。

穩定性檢測程序：在每一個標記為體外診斷的產品上顯示的效期表明了這個產品具有多長時間的效能。我們的穩定性程序確定和證明了產品效期。我們定期監測批量產品，確定產品在推薦貯存條件下具有可接受效果的時間長度。

微生物學檢測：所有血清使用Barile&Kern的大體積方法檢測支原體。在推薦方法的檢測范圍內檢測結果是準確的。樣品至少應該在肉湯中合并培養3個星期，同時要在瓊脂平板上進行不少于4次傳代培養。在有氧和厭氧(95%氮，5%CO2)條件下，平板在36±2℃下孵育。在檢測過程中，每周對瓊脂平板進行一次微生物生長情況檢驗。使用Dienes染色法對懷疑被污染的瓊脂平板進行支原體菌落的檢測。然后，對平板進行再次鏡檢。對孵育肉湯瓶要定期進行濁度和pH值變動的檢測。在推薦方法檢測范圍內，所有血清也要使用Hoechst熒光DNA染色法進行不可在肉湯中培養的支原體(包括M.hyorhinis屬)檢測。

病毒檢測：已知無外來物質的細胞培養基須經過在包含15%測試血清的生長培養基中進行為期21天的三次傳代培養。使用對照培養基和已知對外來物質為陰性的血清平行地維持陰性對照培養。整個期間，檢測所有的培養情況，以便發現是否存在病毒誘發的細胞形態改變或致細胞病變效應。在14至21天的培養期間，對含有檢測血清的平行培養瓶按下面標準病毒檢測方法進行評估。

將其中一瓶檢測細胞用胰蛋白酶消化，然后把細胞分別加入到總面積為6cm 2 的六室載玻片上。同時準備陰性對照載玻片。在檢測培養的單室載玻片上加入牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、牛細小病毒、牛腺病毒、狂犬病毒和呼腸病毒的染色劑，作為單個的陽性對照。再經過7天培養(總共21天)，利用熒光抗體技術檢測病毒。

通過對檢測培養進行蘇木精伊紅染色，觀察致細胞突變效應(CPE)或其他病毒誘導效應。檢測細胞是否存在CPE效應、內含物、多核體或其他異常效應。

內毒素檢測：我們用阿米巴變形細胞溶解物(LAL)凝膠法來檢測胎牛血清的內毒素含量。

效能檢測：
對每一批次的胎牛血清，我們都進行下述培養效能檢測。選擇血清zui重要的標準是其支持特殊細胞的生長能力。因此，除了保證血清通過嚴格的品質控制，我們也同時在實驗室條件下對血清的三個重要的培養效能進行檢測：克隆效率、貼壁效果和二倍體成纖維細胞生長促進。