熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)(Florescence In-Situ Hybridization簡(jiǎn)稱(chēng)FISH)是一種利用非放射性的熒光信號(hào)對(duì)原位雜交樣本進(jìn)行檢測(cè)的技術(shù)
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)應(yīng)用在醫(yī)療行業(yè)：
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)(Florescence In-Situ Hybridization簡(jiǎn)稱(chēng)FISH)是一種利用非放射性的熒光信號(hào)對(duì)原位雜交樣本進(jìn)行檢測(cè)的技術(shù)。它將熒光信號(hào)的高靈敏度、安全性，熒光信號(hào)的直觀(guān)性和原位雜交的高準(zhǔn)確性結(jié)合起來(lái)，通過(guò)熒光標(biāo)記的DNA探針與待測(cè)樣本的DNA進(jìn)行原位雜交，在熒光顯微鏡下對(duì)熒光信號(hào)進(jìn)行辨別和計(jì)數(shù)，從而對(duì)染色體或基因異常的細(xì)胞、組織樣本進(jìn)行檢測(cè)和診斷，為各種基因相關(guān)疾病的分型、預(yù)前和預(yù)后提供準(zhǔn)確的依據(jù)。自20世紀(jì)80年代末，Pinkel和Heiles將FISH技術(shù)引入染色體檢測(cè)領(lǐng)域后，F(xiàn)ISH技術(shù)就在臨床診斷及科研工作中得到了廣泛的運(yùn)用，顯示出與一些傳統(tǒng)技術(shù)相比的明顯優(yōu)勢(shì)。
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)與傳統(tǒng)的免疫組織化學(xué)法（IHC）相比，F(xiàn)ISH具有良好的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。目前免疫組織化學(xué)法正廣泛應(yīng)用于腫瘤等多個(gè)領(lǐng)域的臨床診斷。免疫組化的檢測(cè)對(duì)象是疾病相關(guān)的蛋白。由于蛋白的表達(dá)和本身的構(gòu)象受各種因素的影響很大（例如酸、堿和變性劑），檢測(cè)條件的穩(wěn)定性對(duì)檢測(cè)結(jié)果至關(guān)重要。此外，免疫組化檢測(cè)結(jié)果的判斷依賴(lài)于檢測(cè)者對(duì)顯色結(jié)果的主觀(guān)判斷，對(duì)于一些弱陽(yáng)性的結(jié)果，不同的檢測(cè)者容易產(chǎn)生分歧。上述的因素都可能影響醫(yī)生對(duì)病情的終診斷。
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)檢測(cè)的對(duì)象是細(xì)胞中的DNA，致密的雙螺旋結(jié)構(gòu)使DNA可以歷經(jīng)千百萬(wàn)年而依然保持良好，其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，不易被環(huán)境條件影響，為熒光原位雜交技術(shù)的穩(wěn)定提供了良好的基礎(chǔ)。此外，熒光原位雜交結(jié)果的判定借助于對(duì)熒光的顏色判斷和信號(hào)計(jì)數(shù)，客觀(guān)地量化了檢測(cè)地結(jié)果。如果借助于相應(yīng)的FISH操作系統(tǒng)（例如Abbott-Vysis公司的Hybrit雜交儀和VP2000樣本預(yù)處理系統(tǒng)）和染色體成像系統(tǒng)（例如AI公司的CytoVision）就能實(shí)現(xiàn)整個(gè)FISH操作的自動(dòng)化，大限度的降低操作者和檢測(cè)者的主觀(guān)因素，確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。
PCR由于靈敏度高，操作簡(jiǎn)便快捷是近年來(lái)應(yīng)用比較多的基因診斷技術(shù)，但PCR診斷技術(shù)的假陰性和假陽(yáng)性的比例較高，對(duì)同一樣本也只能作一次分析，不能重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。隨著探針技術(shù)的不斷發(fā)展，F(xiàn)ISH目前的靈敏度已經(jīng)接近或達(dá)到PCR的水平，并能很好彌補(bǔ)PCR技術(shù)的局限。熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)不僅有極低的假陽(yáng)性、假陰性的比例（以Abbott-Vysis的產(chǎn)前診斷探針為例，29,000例的使用結(jié)果證實(shí)正確率高達(dá)99.9％），還能對(duì)同一樣本進(jìn)行多次的FISH操作以及利用不同顏色的熒光探針一次檢測(cè)多個(gè)染色體或基因的異常，大大節(jié)省了檢測(cè)的時(shí)間。此外，通過(guò)FISH可以對(duì)染色體或特定基因的數(shù)目異常，特定片斷的缺失、易位和重排進(jìn)行診斷研究。
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè)目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用在產(chǎn)前及植入前、腫瘤的預(yù)前和預(yù)后以及血液類(lèi)疾病的診斷分型領(lǐng)域。
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