外泌體粒徑檢測服務是包含核酸和蛋白質的小囊泡(30-200 nm),是由各種各樣的細胞分泌產生,在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。本產品是自主開發的外泌體快速提取試劑盒,經過優化處理適用于細胞培養上清液、血清、血漿、尿液和其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳液以及唾液等)中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效獲得高純度的外泌體顆粒。
測量外泌體的粒徑分布一直以來都是外泌體表征的重要組成部分。但是由于外泌體的尺寸僅為30~200 nm,所以必須借助一些特殊的檢測手段才能夠對這種在光學顯微鏡下不可視的顆粒進行觀測。本篇就外泌體粒徑測量技術的發展進行簡述,并對不同技術的差異進行比較。在外泌體發現的早期,由于還沒有專門針對這類尺寸顆粒的分析方法,因此直接在電鏡下面觀察粒徑并統計成為了最早的外泌體粒徑統計方法。但是這種方法費時費力,且通量低,在面對臨床和科研中的大量樣本時顯得十分無力。
由于外泌體與材料學所合成的脂質體在形態上十分相似,因此用于脂質體表征的動態光散射技術(DLS)便被應用于外泌體的尺寸測量上。DLS利用光射到遠小于其波長的小顆粒上時會產生瑞利散射現象,通過觀察散射光的強度隨時間的變化推算出溶液中顆粒的大小。但是這種技術會受到測量物質的顏色、電性、磁性等理化特性的影響,并且對于灰塵和雜質十分敏感。因此使得DLS在測量尺寸較小的粒子時,測量出的粒徑與實際的分布具有較大的偏差。
為了彌補DLS的短板,納米粒子跟蹤分析(外泌體粒徑檢測服務)技術孕育而生。這種技術采用激光散射顯微成像技術,用于記錄納米粒子在溶液中的布朗運動軌跡,并通過Stokes-Einstein方程推算粒子大小。這種技術能夠對30~1000 nm的粒徑進行測量,因此能夠提供更為精確的粒徑數據。在諸多文獻的測試中均取得了較DLS更好的精度,因此成為目前最為主流的外泌體尺寸測量手段。
外泌體粒徑檢測服務技術的工作原理與DLS技術在測量不同尺寸納米球的數據對比。可見相比于DLS,外泌體粒徑檢測服務測量的粒徑分布更為精確。
雖然外泌體粒徑檢測服務取得了比DLS 更高的精準性,但是隨著外泌體研究的深入,其局限性也十分明顯。首先外泌體粒徑檢測服務僅能夠測量溶液中顆粒的平均粒徑尺寸,但是外泌體粒徑檢測服務無法分辨其中的外泌體、囊泡、脂蛋白,也不能區別不同源性的外泌體。這直接限制了外泌體粒徑表征的意義,使得研究者很難探究外泌體尺寸與外泌體來源之間的關系。另外外泌體粒徑檢測服務本身對于測試時的溫度、濃度和校準都有著較高要求,因此使得外泌體粒徑檢測服務在測試較小的粒子時其精度仍不能達到令人滿意的效果,其測試結果卻仍與電鏡、AFM等成像技術所觀測到的粒徑存在著明顯差異。外泌體在TEM下的成像及粒徑統計與外泌體粒徑檢測服務測量的結果對比。可見外泌體粒徑檢測服務測量到的粒徑要比TEM直接測量的結果大50~100。
表征測試是外泌體研究的重要一環,特別是針對分離提取后的外泌體進行濃度檢測和粒徑分布檢測,對于后續的功能和進一步分析是*的步驟。表觀生物提供基于Nanosight儀器定量檢測外泌體粒徑和濃度,方便、快捷、精準,助您深入探索外泌體的神秘世界!
儀器利用激光光源照射納米顆粒懸浮液,利用全黑背景則功能強信號,可以清晰觀察到帶有散射光的顆粒的布朗運動。對于寬分布體系,NTA軟件可以同時對于每一個顆粒進行直接觀測,進行自動跟蹤,進行粒徑計算,并且同時得到整個體系的粒徑分布信息。結合顆粒的散射強度,可以繪制出粒徑,對應數量分布強度和散射強度的三維圖譜,可以對于粒徑相同但是材質不同的樣品作出清晰區分。可以保存顆粒運動的錄像和圖片信息,用于將來做進一步分析。
2、送樣時,樣品須一直處于低溫環境中(推薦干冰寄送;短時間內可以采用藍冰條件下運輸);
3、送樣前須告知溶劑的具體情況;可使用的溶劑,默認為水,其他非腐蝕性溶劑也行;但折射率需與水接近(1.3-1.5),如油不可作為溶劑
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