詳細(xì)介紹
TAPSO
別名 : 3-[N-三(羥甲基)甲an)-2-羥基丙磺酸T
CAS : 68399-81-5
分子式 : C7H17NO7S
分子量 : 259.28
儲存條件 : 室溫干燥
純度 : ≥99.0%
外觀(性狀) : 白色結(jié)晶粉末
單位 : 瓶
TAPSO
等級:生化級
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):
外觀:白色結(jié)晶粉末
含量(滴定):≥99.0%
水分:≤1.0%
溶解性(0.1M水溶液):清澈無色溶液
PH1%DiH2O:4.7-5.3
產(chǎn)品應(yīng)用:在生物實(shí)驗(yàn)中,它是重要的PH穩(wěn)定試劑,通常選擇適當(dāng)?shù)娜跛岷推涔曹棄A混合以得到適合的PH值。大多數(shù)生物反應(yīng)在中性條件下發(fā)生,一般PH選在6-8之間,并且要求緩沖劑有效緩沖范圍也在6-8之間。另外要求緩沖劑的酸堿形式不與某些金屬離子發(fā)生螯合作用。
慢病毒感染快速指南
1. 將目的細(xì)胞按 30%匯合度接種到 24 孔板,約 3-5×104細(xì)胞數(shù)/孔,不同細(xì)胞因?yàn)榧?xì)胞大小不同細(xì)胞數(shù)量會不同,快速指南以細(xì)胞數(shù)量為 5×104為例,加入 500uL wan全培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
2. 接種后 12-20h 感染陰性對照慢病毒(接種細(xì)胞至病毒感染細(xì)胞時間不宜太長,否則細(xì)胞增殖影響細(xì)胞密度不利用后期抗性篩選)。
3.加病毒量計(jì)算方法:(細(xì)胞數(shù)×MOI 值/病毒滴度)×103=病毒量(uL),加病毒量見下表。同時加入 Polybrene,每孔加 0.25uL,濃度為 10mg/mL Polybrene,細(xì)胞培養(yǎng)液中終濃度為5ug/mL。
4.感染 16-20h 后更換培養(yǎng)基,棄去培養(yǎng)基,每孔加入 500uL 新鮮的培養(yǎng)基。
5.感染后 48-96h 顯微鏡觀察熒光。(注:如果 48h-96h 期間細(xì)胞匯合度達(dá)到 100%,請及時傳代培養(yǎng))。
6.建議將 48 孔板細(xì)胞進(jìn)行傳代,傳代 12 孔板,后繼續(xù)觀察熒光,根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)和熒光細(xì)胞比例綜合判斷細(xì)胞感染最佳 MOI 值。一般選擇細(xì)胞生長良好,感染效率 80%左右的感染條件作為最佳感染條件。(注:100%熒光感染不一定為細(xì)胞最佳 MOI 值,因?yàn)榭赡軙斐杉?xì)胞慢病毒感染拷貝數(shù)太高,影響細(xì)胞狀態(tài)。