TMRM是熒光探針(激發(fā),530±21nm;發(fā)射,592±22nm)。存在番紅花素或TMRM時(shí)的熒光信號(hào)在加入谷氨酸后顯示略微降低,表明線粒體內(nèi)膜的極化增加。在存在TMRM(2μM)的情況下,與復(fù)合物I底物或加入復(fù)合物II底物的偶聯(lián)呼吸減少了27%[1]。將海馬培養(yǎng)物暴露于低濃度TMRM(50至500nM)1至3小時(shí)導(dǎo)致神經(jīng)元和潛在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中線粒體的選擇性染色。將海馬培養(yǎng)物暴露于高濃度的TMRM(1至25μM),選擇性且快速地染色線粒體,在5至10分鐘后達(dá)到平臺(tái)期。低濃度的TMRM(50至200 nM)不會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,而較高濃度(0.5和2.5μM)會(huì)增強(qiáng)細(xì)胞凋亡(KD = 500 nM)。
中文名:四甲基羅丹明甲酯(TMRM)
英文名:Tetramethylrhodamine
TMRM
CAS:115532-49-5
分子式:C25H25N2O3
分子量:436.93
純度:≥98%
結(jié)構(gòu)式:
溶解性:可溶于二甲基亞砜和乙醇
儲(chǔ)存溫度:2-8°C儲(chǔ)存,避光,干燥
運(yùn)輸條件:冰袋運(yùn)輸
生化機(jī)理:熒光的可滲透細(xì)胞的陽離子染料,用于測量線粒體膜電位。積累在健康的,帶負(fù)電荷的線粒體中。展品重新發(fā)出橙色熒光(Em = 573 nm)。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn):將培養(yǎng)物暴露于含有TMRM和/或藥物的Millipore過濾溶液(0.22μm)在37℃下1小時(shí)(除了涉及暴露于TMRM的不同持續(xù)時(shí)間的實(shí)驗(yàn)外)。處理后,除去溶液并在無菌條件下重新施用生長培養(yǎng)基,并將培養(yǎng)物在37℃下后孵育18小時(shí)(實(shí)驗(yàn)涉及暴露后不同時(shí)間點(diǎn)的分析)。然后將細(xì)胞在室溫下用2mg / mL雙苯甲酰亞胺染色20分鐘。隨后用鹽水洗滌蓋玻片并使用2P顯微鏡成像。在UV激發(fā)下,凋亡細(xì)胞被鑒定為明亮的熒光核,表明DNA片段化。細(xì)胞存活率計(jì)算為每次處理的5個(gè)顯微鏡視野中活的未染色細(xì)胞的百分比(±SD)
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