TRITC葡聚糖 四甲基羅丹明異硫氰酸酯-葡聚糖
化學名:
四甲基羅丹明異硫氰酸酯-葡聚糖
葡聚糖(3´,6´雙(四甲基氨基)-3-氧代螺(異苯并呋喃-1(3H),9´-[9H]占噸]-5(或6)-基)氨基硫代甲酸酯]
四甲基羅丹明B硫代氨基甲酰基-葡聚糖
結(jié) 構(gòu):
特性:
通過與四甲基羅丹明B異硫氰酸酯(混合異構(gòu)體)偶聯(lián),利用特選葡聚糖組分制備得到了TRITC-葡聚糖。 DS(TRITC)的范圍從0.001到0.008。 在這一低取代度范圍下,羅丹明部分叔氨基的電荷貢獻可以忽略不計。審查了所有批次的分子量、干燥失重和游離TRITC。
光譜數(shù)據(jù)
激發(fā)在550nm下進行,而熒光測量在572nm處進行(見圖12)。我們實驗室的研究表明:TRITC-葡聚糖溶液的熒光在pH 3-9的范圍內(nèi)只有輕微的變化(見圖13)。這在進行定量測量時很有意義。在生物介質(zhì)中進行測量可能會顯著影響熒光強度,其有可能會增強,也有可能會減弱。
圖12. 在0.025M硼酸鹽pH9.0(10mg 鹽溶于50ml緩沖液中)中,TRITC-葡聚糖的熒光掃描光譜。激發(fā)波長:550nm;發(fā)射波長:572 nm。
圖13 TRITC-葡聚糖的熒光強度(em.572nm)與pH的關(guān)系。
儲存和穩(wěn)定性:
TRITC-葡聚糖的穩(wěn)定性尚未有任何詳細研究,但據(jù)推測其與FITC-葡聚糖應較為相似,因為兩種物質(zhì)的取代基均通過硫代氨基甲酰基單元進行連接。只有在高pH(> 9)和高溫下,硫代氨基甲酰基鍵才存在水解的風險(參見FITC-葡聚糖)。 TRITC-葡聚糖溶液(pH 6-7)可以在室溫、黑暗中儲存數(shù)周。儲存在密封容器、黑暗中的干燥粉末保質(zhì)期為5年。
TRITC-葡聚糖的應用:
TRITC-葡聚糖主要用于細胞、血管和組織中的滲透性和運輸研究。熒光的測量可以通過活體熒光顯微鏡定量和實時進行。該技術(shù)具有高靈敏度,可以檢測到組織液中濃度低至1μg/ ml的物質(zhì)。另一個重要的特性是TRITC-葡聚糖不會結(jié)合在動脈壁上54,55。
人們已證明倉鼠頰囊的微血管是由各種炎癥條件所引起的血漿滲漏的有用研究模型。使用合適的過濾器(490 / 520nm),可以通過活體熒光顯微鏡檢查臉頰囊,并用數(shù)碼相機拍攝圖像(參見圖14)。靜脈內(nèi)給予5%TRITC-葡聚糖150生理鹽水溶液(約100mg / kg體重)56-58。。有關(guān)該技術(shù)的更多信息,請參閱Thorball3。 TRITC-葡聚糖已被廣泛應用于組織和細胞的滲透性研究,我們只隨機選擇了少部分參考文獻供您使用59-65。
圖14. 在組胺攻擊15分鐘后,將TRITC-葡聚糖150注射到倉鼠臉頰處。 (已獲得E.Svensjö許可)
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