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人類生長激素(hGH,也稱為生長素)的內分泌系統極為復雜。hGH是位于染色體17上的GH-1基因的產物,在垂體細胞中表達。80%的hGH是一種非糖基化的22千道爾頓(kDa)蛋白質,由191個氨基酸組成。大約20%的hGH是由替代剪接產生的20 kDa的變體形式。此外,還可以在血液循環中發現幾種更小的變體,以及翻譯后修飾的蛋白質和不同程度的蛋白質聚集。生長激素的生物活性由特定結合蛋白(GHBP)調節,GHBP由細胞膜上的GH受體的細胞外部分形成。這些修飾允許對hGH的半衰期及其生物活性進行嚴格控制。除了合成和翻譯后修飾,hGH的分泌也受到嚴格調節。自發的脈沖式分泌每3小時發生一次,夜間睡眠期間分泌量最大。生理壓力或低血糖等不同因素會導致額外的hGH分泌,這是由下丘腦激素生長y素和生長激素釋放激素(GHRH)誘導的。研究表明,分泌的GH量受到多種因素的影響(參考文獻2-5)。
一種用于定量測量血清和血漿(肝素,EDTA)中人類生長激素的酶免疫分析法。僅供研究使用。不用于診斷程序。
作為ALPCO在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品超靈敏人生長激素ELISA。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
超靈敏人生長激素ELISA | ALP-22-HGHHUU-E01 | 查看 |
超靈敏人生長激素ELISA檢測原理:
超靈敏的人類生長激素ELISA是一種夾心測定法。它利用了一種涂在微量滴定板孔上的特異性、高親和力的多克隆兔抗血清。樣品中的hGH與固定化抗血清定量相關。在接下來的步驟中,生物s化抗體與hGH結合。洗滌后,加入鏈霉抗生物s蛋白-過氧化物酶偶聯物,其與抗體的生物s高度特異性結合,并根據樣品的hGH水平催化底物定量變色
樣本類型
血清和血漿
血清和肝素/EDTA血漿產生可比的值。檸檬酸血漿樣本中的hGH水平會降低,因為抗凝劑的量相對較多。除了血清和血漿樣本,hGH還可以在其他體液(如尿液和唾液)中測定,在各種人類細胞系的細胞培養上清液中進行研究。此外,這種超敏感hGH ELISA還可以用來測量濾紙上干血斑樣本中的hGH,這已經過外部驗證(9)。
樣本收集
? 研究表明,人類生長激素在日間/夜間呈脈沖式分泌。
? 血液采樣應使用標準靜脈穿刺。避免溶血樣本。
所需樣本體積:10 ?L
樣本穩定性
在密封樣本瓶中:
? 20-25°C下儲存:3天
? -20°C下儲存:至少2年
在-20°C下儲存樣本超過2年對結果沒有影響。應盡量減少樣本的凍結和融化。五次凍融循環對樣本沒有影響。
樣本稀釋
? 血清/血漿稀釋:用稀釋緩沖液DIL稀釋1:26
? 在PE/PP管中用移液管取250 ?L稀釋緩沖液DIL(在大批量系列中建議使用多步移液器);加入10 ?L樣本(稀釋1:26)。混合后在檢測中使用2x 100?L的該稀釋液。
? 稀釋后樣本的穩定性:在20-25°C下最多1小時。
? 在血清和血漿以外的樣本中,hGH水平可能有很大差異,用戶必須自行找到最佳的稀釋比例。
干擾
樣本中的甘油三酯和膽紅s在100 mg/mL和200 ?g/mL的濃度下不會干擾。然而,應由用戶驗證溶血、脂血或黃疸樣本的使用。
試驗比較研:
究Langkamp等人將用于人類生長激素測量的內部試驗與該試驗進行了比較(9)。結果顯示了非常好的可比性(見下圖)。
文獻參考:
1. Hauffa BP, Lehmann N, Bettendorf M, Mehls O, D?rr H-G, Partsch C-J, Schwarz HP, Stahnke N,Steinkamp H, Said E, Sander S, Ranke MB and participating Members of the German KIGS/IGLU StudyGroup (2004); Central reassessment of Growth hormone concentrations measured at local treatmentcenters in children with impaired growth: consequences for patient management. European Journal ofEndocrinology 150: 291 – 297
2. Baumann G (1991); Growth Hormone heterogeneity: Genes, Isohormones, variants and bindingprotein. Endocr Rev 12:424-449
3. Clemmons DR, Chihara K, Freda PU, Ho KKY, Klibanski A, Melmed S, Shalet S, Strasburger CJ,Trainer PJ, Thorner MO (2003); Optimizing control of acromegaly: Integrating a Growth Hormonereceptor antagonist into the treatment algorithm. J Clin Ebdocrinol Metab 88:4759-4767
ALPCO產品種類多樣,可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等,涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域,尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。
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