人胎盤催乳素ELISA是一種酶免疫測定法，用于定量測定血清中的人胎盤催乳素（hPL）。僅供研究使用。不適用于獨立程序

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品人胎盤催乳素（HPL）ELISA。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

人胎盤催乳素（HPL）ELISA檢測原理：

hPL ELISA試劑盒是基于上述原理的固相酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。微量滴定孔涂有針對hPL分子d特抗原位點的單克隆[小鼠]抗體。將含有內源性hPL的樣品等分試樣與酶偶聯物在包被孔中孵育，酶偶聯物是一種與辣根過氧化物酶偶聯的抗hPL抗體。孵育后，洗掉未結合的結合物。結合的過氧化物酶的量與樣品中hPL的濃度成正比。加入底物溶液后，顯色強度與樣品中hPL的濃度成正比。

檢測程序注意事項：手動移液：建議每次檢測運行不要使用超過32個孔。所有標準品、樣本和對照品的移液應在3分鐘內完成。自動移液：每次檢測運行可以使用96孔的完整板。然而，建議所有標準品、樣本和對照品的移液在3分鐘內完成。每次運行必須包括一個標準曲線。

1. 在架子上固定所需數量的微孔板孔。

2. 使用新的一次性吸頭，向適當的孔中分別加入10 ?L的標準品、對照品和預稀釋樣本。

3. 向每個孔中加入100 ?L的酶結合物。c底混合10秒鐘。這一步w全混合非常重要。

4. 在室溫下孵化30分鐘。

5. 迅速搖動孔內液體。用蒸餾水（每個孔300 ?L）沖洗孔5次。在吸水紙上用力敲擊孔以去除殘留液滴。重要注意事項：洗滌程序的正確執行對本檢測的靈敏度和精確度有很大影響！

6. 向每個孔中加入100 ?L的底物溶液。

7. 在室溫下孵化10分鐘。

8. 通過向每個孔中加入50 ?L的終止液來停止酶促反應。

9. 使用微孔板讀取器，在450 ± 10 nm處測定每個孔的吸光度（OD）。建議在加入終止液后10分鐘內讀取孔。

結果計算

1. 計算每組標準品、對照品和樣本的平均吸光度值。

2. 使用半對數坐標紙，通過將每個標準品的平均吸光度與其濃度繪制在圖表上，吸光度值在垂直（Y）軸上，濃度在水平（X）軸上，構建標準曲線。

3. 使用每個樣本的平均吸光度值，從標準曲線上確定相應的濃度。

4. 自動方法：使用說明書中的結果已使用4參數曲線擬合自動計算。（s選4參數Rodbard或4參數Marquardt方法。）其他數據簡化功能可能會給出略有不同的結果。

5. 樣本的濃度可以直接從這個標準曲線上讀取。濃度高于最高標準品的樣本必須進一步稀釋或報告為> 20 mg/L。在計算濃度時，必須考慮這個稀釋因子。

結果的可靠性

測試必須嚴格按照制造商的使用說明進行。此外，用戶必須嚴格遵守GLP（良好實驗室規范）或其他適用的國家標準和/或法律。這對于使用對照試劑尤為重要。在測試程序中始終包含足夠數量的對照對于驗證測試的準確性和精確性是重要的。只有在所有對照都在z定范圍內，且所有其他測試參數也在給定的測試規格內時，測試結果才有效。如有任何疑問或擔憂，請聯系ALPCO。

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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