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該HGH ELISA用于定量測定人血清中的人類生長激素(HGH)濃度。僅供研究使用。不用于診斷程序。
作為ALPCO在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品人類生長激素(HGH)ELISA。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
人類生長激素(HGH)ELISA | ALP-25-HGHHU-E01 | 查看 |
人類生長激素(HGH)ELISA檢測原理:
這種生長激素(HGH)酶聯免疫吸附測定(ELISA)基于固相酶聯免疫吸附測定的原理。該測定系統使用羊抗HGH抗體進行固相(微孔板)固定,以及在抗體-酶(辣根過氧化物酶)結合溶液中的小鼠單克隆抗HGH抗體。樣本被允許與抗體同時反應,導致HGH分子被夾在固相和酶聯抗體之間。在室溫下孵育45分鐘后,用水潤洗孔以去除未結合的標記抗體。加入TMB溶液并孵育20分鐘,導致藍色出現。通過加入1N鹽酸停止顏色發展,顏色變為黃色,并在450納米處用分光光度計測量。HGH的濃度與測試樣本的顏色強度成正比。
未提供的材料清單
1. 蒸餾水或去離子水
2. 精密移液管:0.05、0.1、0.2 和 1 mL
3. 一次性移液管頭
4. 能夠讀取450nm吸光度的微孔板讀取器
5. 吸水紙
6. 坐標紙
7. 漩渦混合器或同等設備
8. 質量控制材料(例如,BioRad Lyphochek對照血清)
9. 計時器
試劑盒和儀器的儲存
收到后未開封的試劑盒應存放在2-8°C的環境中,微孔板應存放在帶有干燥劑的密封袋中,以減少潮濕空氣的接觸。按照上述方法儲存,開封后的試劑盒在有效期內保持穩定。微孔板讀取器的帶寬應為10nm或更小,450nm波長下的光密度范圍應為0-2 OD或更大,適用于吸光度測量。
試劑準備
使用前應讓所有試劑達到室溫(18-25°C)。
測定程序
1. 將所需數量的包被孔固定在支架中。
2. 將50?L的標準品、樣本和對照品移液至相應的孔中。
3. 向每個孔中加入100 ?L的酶結合試劑。
4. c底混合30秒。這一步w全混合非常重要。
5. 在室溫(18-25°C)下孵育45分鐘。
6. 將孵育混合物通過甩動板子內容物到廢物容器中移除。
7. 用蒸餾水沖洗微孔板5次,并甩動。
8. 將孔猛擊在吸水紙或紙巾上,以去除所有殘留水滴。
9. 向每個孔中分發100?L的TMB試劑。輕輕混合10秒。
10. 在室溫下,避光孵育20分鐘。
11. 通過向每個孔中加入100?L的終止液來停止反應。
12. 輕輕混合30秒。確保所有的藍色w全變為黃色。
13. 在15分鐘內使用微孔板讀取器讀取450nm的吸光度。
結果計算
1. 計算參考標準、對照品和樣本的重復組的吸光度平均值(A450)。
2. 通過在坐標紙上繪制每個參考標準的平均吸光度與其濃度(ng/mL)的線性圖,構建標準曲線,吸光度在垂直(y)軸上,濃度在水平(x)軸上。
3. 使用每個樣本的平均吸光度值,從標準曲線上確定相應的HGH濃度(ng/mL)。
標準曲線示例
下面展示了一個典型的標準運行結果,其中450nm處的光密度讀數顯示在Y軸上,而HGH(納克/毫升)顯示在X軸上。注意:標準曲線僅供說明之用,不應用來計算未知值。
ALPCO產品種類多樣,可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等,涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域,尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。
作為ALPCO在中國區域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產品。
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