Resistin，一種富含半p氨酸的11.3 kDa蛋白質（1），最初在小鼠中被發現（2），與RELM、RELMβ和RELM一起構成抗素樣分子（RELM）蛋白家族。在人類中，只發現了resistin和RELMβ（1），但沒有發現RELM家族的其他蛋白質。人類resistin與小鼠蛋白的同源性為53%（4）。它含有11個半p氨酸殘基，作為108個氨基酸的前體合成，并以二聚體形式分泌，具有半p氨酸殘基的二硫鍵。除了這個分子間的二硫鍵，還存在5個額外的分子內二硫鍵。通過尺寸排除色譜法證明了多聚體和寡聚體的形成。由此表明，寡聚體的形成對SDS不敏感，但可以被β巰基乙醇抑制，因此可能是由二硫鍵引起的（1）。此外，resistin結構似乎還取決于濃度，因為圓二色譜分析顯示了從α-螺旋到β-折疊結構的濃度依賴性轉變（1）。已在小鼠的白色脂肪組織、垂體和胰島以及大鼠的棕色脂肪組織中證明了resistin的表達。在人類中，可以在脂肪細胞中檢測到resistin的表達，但僅在非常低的水平。然而，在體外已顯示非脂肪細胞的脂肪組織中resistin的表達。人類resistin基因也在胰島、前脂肪細胞、巨噬細胞和骨髓中表達。因此，resistin與炎癥過程以及脂質代謝相關。大多數研究涉及小鼠模型。在這里，證明了血清中三聚體和六聚體resistin的存在。與脂聯素生物學相比，不同的resistin寡聚體具有不同的生物學功能是非常可能的。在小鼠中，經驗性地發現了脂肪性、胰島素抵抗和resistin表達之間的相關性。在人類中，研究結果并不明確——一些研究顯示resistin血清濃度與脂肪性或胰島素抵抗相關。但其他研究未能證實這些結果。因此，需要有效和可重復的測定resistin血清濃度。resistin在能量代謝之外的生理過程中的相關性已通過幾種不同的方法進行了研究。與內皮細胞的實驗給出了有趣的結果。在這里，resistin被證明可以增強VCAM-1和ICAM-1的表達。因此，resistin可能能夠影響內皮炎癥，從而影響動脈粥樣硬化。這些結果通過在小鼠中的實驗得到了驗證，在那里內皮素-1被證明可以調節resistin的分泌。在最近的研究中，人類resistin被證明可以增加前脂肪細胞的增殖和成熟脂肪細胞的脂解。通過調節MAPK信號傳導途徑，resistin對能量代謝施加關鍵影響。

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耐藥超敏EIA(96孔)檢測原理：

抵抗素的酶免疫測定是一種所謂的夾心法。它利用了一種涂在微量滴定板孔上的特異性高親和力多克隆兔抗血清。樣品中的抵抗素與固定化抗血清定量結合。在接下來的步驟中，生物s化的檢測試劑依次與抵抗素結合。洗滌后，加入鏈霉抗生物s蛋白-過氧化物酶-酶偶聯物，并與結合的檢測抗體上的生物s結合。在封閉底物反應中，顏色變化將根據樣品的抵抗素水平定量催化。

樣本

1 樣本類型

血清和血漿樣本均適用。在相應的血清、肝素血漿、EDTA血漿和檸檬酸血漿樣本中未發現resistin水平的顯著偏差。必須考慮抗凝劑可能對樣本造成的稀釋。通過特殊的樣本緩沖液，測定前不需要外部樣本準備（見下文）。

2 樣本收集

血清制備的血液樣本應按照標準化的靜脈穿刺程序獲取。樣本應無抗凝劑儲存。必須避免溶血。血液必須凝固，并且在w全凝固后，通過離心分離出血清。

3 所需樣本體積：15 ?L

4 樣本儲存

在緊閉的塑料管中儲存。

- 在20 - 25 °C下最多儲存2天

- 在–20°C下最少儲存2年

在–20°C下儲存樣本2年以上對測量值無影響。應盡量減少樣本的凍融循環。

5 干擾

在100mg/mL、100 ?g/mL和1 mg/mL的濃度下分別測試了樣本中的甘油三酯、d紅素和溶血產物。溶血樣本似乎會顯示錯誤的高resistin水平，應批判性地檢查使用此類樣本。用戶應驗證使用溶血、脂血或黃疸樣本。

6 血清和血漿樣本稀釋

稀釋：1:21與樣本緩沖液（SB）。

在PE/PP管中移液300 ?L樣本緩沖液SB（在大量系列中推薦使用多步移液器），加入15 ?L血清或血漿樣本（稀釋1:21）。混合后，可以使用兩個100 ?L樣本在測定中雙重評估樣本。根據預期的resistin水平，可能需要調整稀釋比例。樣本可以稀釋在1:5到1:400之間。樣本緩沖液的配方是為了允許正確測定resistin。建議樣本至少用樣本緩沖液稀釋1:5！

文獻參考：

1. Aruna B, Ghosh S, Singh AK, Mande SC, Srinivas V, Chauhan R, Ehtesham NZ. Humanrecombinant resistin protein displays a tendency to aggregate by forming intermoleculardisulfide linkages. Biochemistry 2003;42(36):10554-9.

2. Steppan CM, Lazar MA. Resistin and obesity-associated insulin resistance. Trends EndocrinolMetab 2002;13(1):18-23.

3. Yang RZ, Huang Q, Xu A, McLenithan JC, Eisen JA, Shuldiner AR, Alkan S, Gong DW, EisonJA. Comparative studies of resistin expression and phylogenomics in human and mouse.Biochem Biophys Res Commun 2003;310(3):927-35.

4. Banerjee RR, Lazar MA. Resistin: molecular history and prognosis. J Mol Med 2003;81(4):218-26.

5. Banerjee RR, Lazar MA. Dimerization of resistin and resistin-like molecules is determined by asingle cysteine. J Biol Chem 2001;276(28):25970-3

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