發酵設備滅菌安全操作步驟

濕熱滅菌法

• 準備工作：

• 設備檢查：檢查發酵設備的完整性，包括罐體、管道、閥門、攪拌器、溫度傳感器、pH 電極、溶氧電極等部件是否正常，有無損壞或泄漏。同時確保所有的接口、連接部位都已密封好146.

• 清潔消毒：先將發酵罐內的殘留物清除干凈，可以使用冷水、熱水、堿性清潔劑等進行清洗，然后用清水沖洗，去除清洗劑和殘留物3.

• 電極處理：取下溫度傳感器、pH 電極、溶氧電極等敏感部件，溫度傳感器一般不需要滅菌；pH 電極滅菌前要標定，取下 pH 電纜線，蓋上紅色保護帽，將 pH 電極插到底并擰緊；溶氧電極用飽和的亞硫酸鈉溶液標定 0 點，取下 DO 電纜線，DO 電纜接口處用錫箔紙包好，注意檢查溶氧電極里頭的保護液是否充足，不足則需添加148.

• 管道拆卸：拆下發酵罐上和冷凝器上的進、出水管，拆下的同時要用夾子夾住拆下水管的接頭處，防止水流出；發酵罐上的過濾器兩端要用夾子夾死，過濾器的出口處用錫箔包好148.

• 物料移除：將發酵罐內的培養基、發酵液等物料全部排出，并妥善處理，防止污染環境。

• 滅菌操作：

• 裝鍋：將預處理好的發酵設備放入滅菌鍋中，注意不要使設備與滅菌鍋內壁接觸，避免局部過熱。對于大型發酵罐，可能需要分段滅菌，將各部件分別放入滅菌鍋的不同位置148.

• 通入蒸汽：打開蒸汽發生器入口閥門，啟動蒸汽發生器，先將蒸汽發生器內的鐵銹等雜質排出，然后關閉排水閥。慢慢打開蒸汽發生器主閥和夾套入口閥，向夾套內通入蒸汽，開始時蒸汽壓力不穩定，壓力表指針可能劇烈抖動，可適當關閉夾套入口閥，待壓力穩定后再全開夾套出口閥，使蒸汽在夾套內循環，對發酵罐進行預熱6.

• 升溫升壓：繼續通入蒸汽，使滅菌鍋內的溫度和壓力逐漸升高，一般要求溫度達到 121℃，壓力達到 0.105MPa 左右。升溫過程中要注意觀察溫度和壓力的變化，防止超溫超壓28.

• 保持時間：在達到設定的溫度和壓力后，保持 20-30 分鐘，以確保滅菌。保持時間應根據發酵設備的大小、裝載量、培養基成分等因素適當調整28.

• 冷卻與后處理：

• 冷卻降壓：滅菌完成后，先關閉蒸汽發生器主閥，停止通入蒸汽，然后緩慢打開滅菌鍋的排氣閥，逐漸排出蒸汽，使滅菌鍋內的壓力和溫度降低。降壓過程要緩慢進行，防止因壓力驟降導致發酵設備損壞或培養基沸騰溢出。

• 取出設備：當滅菌鍋內的壓力降至常壓，溫度降至 60℃以下時，方可打開滅菌鍋取出發酵設備。取出時要佩戴防護手套，防止燙傷148.

• 部件安裝與調試：將拆卸下來的部件如溫度傳感器、pH 電極、溶氧電極、進水管、出水管等按照正確的方法安裝回發酵罐上，并檢查各部件是否安裝牢固，連接是否緊密。對溶氧電極進行標定，檢查空壓機的輸出壓力等參數是否正常148.

干熱滅菌法

• 準備工作：

• 設備清洗與干燥：與濕熱滅菌法的清潔消毒步驟類似，先將發酵設備清洗干凈，去除內部的污垢和殘留物，然后將設備晾干或用烘箱烘干，確保設備內無水分殘留。

• 物品準備：將需要滅菌的發酵設備及部件放入干熱滅菌箱中，注意物品之間要留有一定的空隙，以便熱空氣流通，保證滅菌效果。

• 滅菌操作：

• 設定參數：關閉干熱滅菌箱門，打開電源，設定滅菌溫度和時間。一般干熱滅菌的溫度為 160-180℃，保持 2-4 小時2.

• 開始滅菌：啟動干熱滅菌箱，開始加熱升溫，在滅菌過程中要密切觀察溫度的變化，確保溫度穩定在設定范圍內。由于干熱滅菌的溫度較高，時間較長，操作人員要注意防止燙傷，并避免在滅菌過程中打開滅菌箱門，以免影響滅菌效果。

• 冷卻與后處理：

• 冷卻：滅菌完成后，關閉干熱滅菌箱電源，讓設備在滅菌箱內自然冷卻至室溫。切勿在高溫下取出設備，以免造成人員燙傷和設備損壞。

• 取出設備：待設備冷卻后，方可打開滅菌箱門取出發酵設備。取出時要小心操作，防止碰壞已滅菌的設備和部件。使用前檢查設備的完整性和性能是否正常。

化學滅菌法

• 準備工作：

• 設備清潔：先對發酵設備進行清洗，去除表面的污垢和雜質，確保設備表面干凈光滑，以便化學藥劑能夠充分接觸和發揮作用。

• 選擇藥劑：根據發酵設備的材質、污染程度以及滅菌要求，選擇合適的化學滅菌劑，如甲醛、過氧乙酸等，并按照規定的濃度和用量進行配制2.

• 個人防護：操作人員要佩戴好防護手套、口罩、護目鏡等個人防護用品，防止化學藥劑對人體造成傷害。

• 滅菌操作：

• 密封設備：將發酵設備及相關管道密封好，確?；瘜W滅菌劑能夠在密閉的環境中充分發揮作用，提高滅菌效果。

• 導入藥劑：按照一定的方法將配制好的化學滅菌劑導入發酵設備內。例如，對于甲醛熏蒸法，可以在容器中加熱甲醛溶液使其揮發，或者使用甲醛發生器將甲醛氣體導入設備及管路內；對于過氧乙酸熏蒸法，可以將過氧乙酸加熱蒸發或使用噴霧器將過氧乙酸溶液霧化后導入設備及管路內2.

• 保持時間：保持一定的溫度和濕度，讓化學滅菌劑在設備內作用一定時間。一般甲醛熏蒸需要保持 8-12 小時，過氧乙酸熏蒸需要保持 2-4 小時2.

• 后處理：

• 通風換氣：滅菌完成后，要對發酵設備進行充分的通風換氣，以去除殘留的化學滅菌劑。通風時間要足夠長，確保設備內的化學藥劑濃度降至安全范圍以下，避免對后續的發酵過程和操作人員造成危害2.

• 清洗設備：通風換氣后，用清水對發酵設備進行清洗，去除殘留的化學藥劑和可能產生的化學反應產物，然后再用無菌水沖洗一遍，確保設備內部干凈無菌。

本廠閑置二手自吸式發酵罐