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化膿隱秘菌原名PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-03-10 16:48:31瀏覽次數:130

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50T
應用領域 化工 主要用途 僅供科研實驗
英文名稱 Truperella pyogenes(Corynebacterium pyogenes)PCR    
化膿隱秘菌原名PCR檢測試劑盒公司正在銷售的產品:魯氏不動桿菌PCR檢測試劑盒 Acinetobacter lwoffiPCR.大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒 Escherichia coliPCR.青霉通用PCR檢測試劑盒 Penicillium spp.PCR

詳細介紹

實時熒光定量PCR
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:
1
Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。
2
Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現性定量方法,已得到,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

4.png


操作流程
收集基因信息——>設計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產物 ——> 用感受態細胞做轉化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質粒抽提——>質粒測序——>測序結果分析——>克隆信息輸入數據庫——>質粒實物保存。

產品名稱

英文名稱

規格

化膿隱秘菌原名PCR檢測試劑盒

Truperella pyogenes(Corynebacterium pyogenes)PCR

50T

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PCR實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93
預變性3-5min,進入循環擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環30-35次,在727min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4
待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

定量PCR方法:
a、競爭法  產品僅用于科研實驗
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b
、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
c
PCRELISA
利用di高辛等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗di高辛酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,最終酶使底物顯色。常規的PCRELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。

操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4。
2.
設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.
樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.
除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37
水浴鍋或恒溫箱溫育60min
5.
棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.
每孔加入底物AB50μL,37
避光孵育15min。
7.
每孔加入終止液50μL15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

下列是公司正在銷售的產品:
IL-12 大鼠白介素-12Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-DDX4/MVH DDX4抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Nectin 4 脊髓灰質炎病毒受體相關蛋白4抗體 規格 0.2ml

Human leukoregulin,LR ELISA Kit 人白細胞調節素 96T

Synaptotagmin-14 英文名稱: 突觸結合蛋白14抗體 0.2ml

CT27 英文名稱: /抗原27抗體(高遷移率族蛋白) 0.2ml

Anti-DDX4/MVH DDX4抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

FPRL1: 脂氧素受體1抗體 0.1ml

細胞表面趨化因子受體3抗體 Anti-CXC-R3/CD183 0.2ml

Anti-P311 protein/FITC 熒光素標記神經再生相關蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-VEGFR2(Tyr951) 0酸化血管內皮生長因子受體2抗體 規格 0.1ml

IgG-Fc/Biotin 化兔抗小鼠IgG-Fc IgGMulti-class antibodies規格: 0.3ml
化膿隱秘菌原名PCR檢測試劑盒小鼠皮膚橋蛋白(DPT)ELISA試劑盒 ,英文名: DPT ELISA Kit

25羥基D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA檢測試劑盒Human25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISAKit 96T/48T

大鼠載脂蛋白H(Apo-H)免疫試劑盒 Rat apolipoprotein H,Apo-H ELISA Kit

英文名稱HumanFlt-3ELISAKitFlt-3規格:96T/48T

動物組織線粒體FATP(FtypeATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20

ELISAKitCys-C兔半胱抑制劑/胱抑素C規格:48T/96T


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