化工儀器網
技術文章
人elisa試劑盒實驗縮小誤差的8個要點
閱讀：635 發布時間：2019-1-25人elisa試劑盒的基本原理是抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水 性部分相互吸附，并保持其免疫學活性； 抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學 和酶學活性； 酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反 應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
在人elisa試劑盒測定中試劑的準備*為關鍵的是，在實驗開始前，將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20min以上后，再進行測定，以使人elisa試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的，主要是為了在后面的溫育反應步驟中，能使反應微孔內的溫度較快地達到所要求的高度，以滿足測定要求。
通常我們做一個實驗，出現誤差是難免的，我們所要做到的是如何縮小誤差的產生，在操作的過程中，我們除了需要多點細心之外，還有一些需要重點注意的地方，今天的文章中，elisa試劑盒的技術人員為您總結出人elisa試劑盒實驗縮小誤差的8個要點：
一：檢驗技
應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀器、器械，具有一定總結和分析問題的能力，對實驗中出現的意外情況能及時妥善解決。
二：使用校對過的微量移液器，排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。
三：仔細閱讀說明書
嚴格按照人elisa試劑盒說明書要求進行規范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方，反復試驗確定成立后才能改進。
四：洗滌*
洗板不*，酶結合物本底顯色會呈現假陽性。洗滌液要新鮮，現用現配，陳舊的洗滌液會出現本底增高現象，也可能出現假陽性。
五：嚴控反應時間
反應時間過長，酶失活；反應時間過短，酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合，生成物結構松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假陰性。
六：注意人elisa試劑盒保存期，過保存期的試劑不能使用。
七：評估試劑的實用性
試劑的穩定與否，對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗，判定人elisa試劑盒符合要求后方可使用。
八：嚴格掌握顯色時間
顯色時間過短，加入終止液反應終止后，底物結合物的量過少，易出現假陰性。超過顯色要求時間后顯色，應判為假陽性，這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色，不可報陽性，這可能是本底顯色的結果。