詳細介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
BidBH3 結構域凋亡誘導蛋白ELISA Kit | Bid ELISA Kit | GOY-E99923 |
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
具有如下優點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節省實驗經費。
性能:
1) 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
2) 靈敏度:檢測濃度小于1.0 pg/ml。
3)特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4) 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
5) 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6) 有效期:6個月
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
2.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
3%NaCl 20支
3%NaCl精氨酸雙水解酶 20支
3%NaCl賴氨酸脫羧酶 20支
3%NaCl鳥氨酸脫羧酶 20支
MR-VP 20支
1%NaCl甘露醇 20支
OF 20支
1%NaCl乳糖 20支
ONPG 20支
賴氨酸脫羧酶肉湯 20支
尿素酶 20支
1%NaCl纖維二糖 20支
明膠 20支
1%NaCl阿拉伯糖 20支
BidBH3 結構域凋亡誘導蛋白ELISA KitUBE2J2 泛素蛋白連接酶J2抗體 規格: 0.2ml
c-fos c-fos抗體 規格: 0.1ml
Donkey Anti-human IgG/Cy3 Cy3標記的驢抗人IgG 規格: 0.1ml
Mouse anti-Bovine IgG ascites 小鼠抗牛IgG腹水 規格: 1ml
MDMX MDM2樣P53蛋白結合抗體 規格: 0.2ml
CPEB1 細胞質多聚苷酸結合蛋白1抗體 規格: 0.1ml
CGB 嗜鉻粒素B抗體 規格: 0.1ml
NF-H/Neurofilament H/Neurofilament 200 高分子量神經絲蛋白抗體 規格: 0.1ml
COMMD8 銅代謝結構域蛋白8抗體 規格: 0.2ml
MAGEB4 黑色素瘤相關抗原B4抗體 規格: 0.2ml
C18orf1 18號染色體開放閱讀框1抗體 規格: 0.2ml
TERT 端粒酶逆轉錄酶抗體 規格: 0.1ml
HN1L 雄激素調節樣蛋白抗體 規格: 0.2ml
PPIL1 親環素相關蛋白1抗體 規格: 0.2ml