實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。

ELISA Kit檢測試劑盒優(yōu)點多，更加方便我們的科研學者進行科學實驗，是科研實驗的好伙伴。

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樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
注意事項：
1.加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復合物脫離；
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次，或適當增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應板應水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果，酶標儀不應置于陽光或強光照射下，需先預熱15-30 min再進行測試。

人蛋白二硫化物異構酶A5(PDIA5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human PDIA5 (Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit

人神經(jīng)生長因子(NGF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human NGF (Nerve Growth Factor) ELISA Kit

人絲氨酸蛋白酶33(PRSS33)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human PRSS33 (Protease, Serine 33) ELISA Kit

人低分子量細胞角蛋白(CK-LMW)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CK-LMW (Cytokeratin Low Molecular Weight) ELISA Kit

人低分子肝素(LMWH)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human LMWH (Low Molecular Weight Heparin) ELISA Kit

人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human LMP7/PSMB9 (Low Molecular-weight Protein/proteasome Beta-type Subunit) ELISA Kit

人低密度脂蛋白(LDL)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human LDL (Low Density Lipoprotein) ELISA Kit

人低密度脂蛋白受體(LDLR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human LDLR (Low Density Lipoprotein Receptor) ELISA Kit

人低密度脂蛋白受體相關蛋白6(LRP6)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human LRP6 (Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein) ELISA Kit

人抵抗素(RETN)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human RETN (Resistin) ELISA Kit

人核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kβ1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human RPS6Kβ1 (Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1) ELISA Kit

人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFβ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human ETFβ (Electron Transfer Flavoprotein Beta Polypeptide) ELISA Kit

人淀粉樣前體蛋白(APP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human APP (Amyloid Precursor Protein) ELISA Kit

人毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human M-AChR (Muscarinic Acetylcholine Receptor) ELISA Kit

ATA抗滋養(yǎng)膜細胞抗體ELISA Kit冬凌草甲素 CAS 28957-04-2 規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/vial 訂購|咨詢

漢黃芩素 CAS 632-85-9 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial 訂購|咨詢

8-O-乙酰山梔苷甲酯 CAS 57420-46-9 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial 訂購|咨詢

羅通定 CAS 10097-84-4 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial 訂購|咨詢

黃柏堿 CAS 6873-13-8 規(guī)格： HPLC≥98%；10mg/vial 訂購|咨詢

野黃芩苷 CAS 27740-01-8 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial 訂購|咨詢

草質(zhì)素 CAS 527-95-7 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial 訂購|咨詢

蘆薈大黃素 CAS 481-72-1 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial 訂購|咨詢

鼠李糖 CAS 6155-35-7 規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/vial 訂購|咨詢

紫云英甙 CAS 480-10-4 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial 訂購|咨詢

原薯蕷皂甙 CAS 55056-80-9 規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/vial 訂購|咨詢

辛弗林 CAS 34520 規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/vial 訂購|咨詢

Food Green . 3 固綠 CAS  規(guī)格： 10G 訂購|咨詢

藤黃酸（鑒別用） CAS 2752-65-0 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。*，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。