上海細胞庫,小鼠胚胎成纖維細胞,CF-1 MEF,細胞培養試劑*:
上海蒂科生物主營業務:胎牛血清(HAKATA、HyClone、SERANA、NTC、Corning、BOVOGEN、PAA、PAN、SIGMA),無外泌體血清SBI,ELISA試劑盒,細胞(400多種類通過STR鑒定),培養基(干粉、液體),雙抗,胰酶,CST,abcam,sigma等抗體。詳詢(同號)。
細胞培養是實驗室里zui常見和zui基本的實驗了,但卻不是zui簡單的。別小看細胞培養,這里可蘊含著大學問。有時候細胞狀態不好,轉染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養的因素很多,讓我們先從培養基和血清說起。
上海細胞庫,小鼠胚胎成纖維細胞,CF-1 MEF,細胞培養試劑*:
經典的培養基有很多種,HAKATA、HyClone、Sigma等。其中DMEM、RPMI-1640、MEM、DMEM/F12都是應用zui廣泛的培養基。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細胞的培養。
◆ MEM是由Eagle’s基礎培養基(BME)發展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度。
◆ Dulbecco改良的BEM(DMEM)培養基是為小鼠成纖維細胞設計的,現在常用于貼壁細胞的培養。
DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。zui初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。
◆ aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應用于各種細胞類型,包括對營養成分要求苛刻的細胞。
◆ Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的,現在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物,這種培養基已應用于許多原代培養及更難養的細胞系的培養。
◆ RPMI-1640培養基是專為淋巴細胞培養而設計的,現在已廣泛應用于懸浮細胞的培養。
,細胞培養試劑*:
以前經常聽到有人問,這種細胞該用哪一種培養基呢?其實這個問題的答案可以很簡單,也可以好復雜。此話怎講?如果這種細胞是購自ATCC 或其他的細胞庫,那很簡單,問供應商就行了。或者找到相關的文獻,作為參考。 Invitrogen上有一個Cell Line Database的工具,也很好用。選擇你感興趣的細胞類型,它就會彈出推薦的培養基、血清和轉染試劑等,有時還有優化好的轉染步驟,很方便。Sigma上也有一個Media Expert,包括了培養基所有成分的功能描述、使用推介和參考文獻等,它還是一個解決問題能手,對于細胞培養中的常見問題,如細胞貼壁不好、培養基變色等,它都會列出可能的原因,并提供補救辦法。這個Expert果然不簡單! 但如果你是著手建立一種全新細胞的培養體系,根本找不到任何參考,那你就得花點時間自己試驗了。萬事開頭難嘛。因為沒有一個標準答案。在MEM中培養的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,shou選MEM做貼壁細胞培養、RPMI 1640做懸浮細胞培養會是一個好的開始。你也可以購買幾種培養基來,然后花大約兩周的時間做一個簡單的細胞生長實驗,來選擇其中zui適合的。有時候你會驚訝地發現你的zui佳培養條件與文獻報道的不同,就算是同一種培養條件,細胞的生長狀態也時好時壞,這是很正常的。因為試劑、水、不同批號的血清之間都存在著差異。要提高培養基的穩定性,可以從培養基和血清兩方面入手。
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以前大部分實驗室都是用干粉培養基,但配制過程就較為繁瑣,要溶解、調pH值,過濾,過程中可能會產生一些濃度誤差,而且有些實驗室的水質并不理想,所以培養的效果會有差異。如果使用液體培養基,這種人為的誤差會減少,因為畢竟是大批量工業化生產的,批間差會很小。大家是不是感覺液體培養基會貴很多,以前是這樣,但現在非也。HyClone和Invitrogen都在國內建立了液體培養基的生產基地,生產和運輸成本大幅降低,所以現在的價格也只是50-60元/500ml,比干粉培養基貴不了多少,而且還幫你省了過濾器和時間。
血清含有生長因子可促進細胞的繁殖,含有附著因子可促進細胞的貼壁,同時還具有抗胰酶活性。血清同時也是礦物質、脂類及激素的來源。zui常用的血清有小牛血清、新生牛血清、胎牛血清和馬血清等。牛血清是按照采血時間的早晚來分類的。采血時間越早,營養物質越豐富,所含抗體也越少,因而胎牛血清適合要求高的細胞系和克隆化培養。由于瘋牛病的原因,到目前為止,我國政府仍然禁止從北美洲、歐洲和日本等地區進口牛血清,因此市面上的牛血清大多來自澳洲、南美洲,或是國產的。 而血清批次間的差別就是不可避免的,這種差異來源于不同的制備方法和除菌方法、動物的年齡差別及血清的儲存條件等,而且與取血動物的來源關系密切。不同的牧場、不同的氣候天氣及其他環境因素都可能影響血清的質量。因此選好了一種血清就要盡可能長期使用它。在需要更換時,也要盡量保持與原有的一批血清相似。
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現在很多公司都提供血清預留,你一旦選定了某個批次的血清,zui好備足一年的量,這樣可以避免很多麻煩。血清固然是細胞培養中*的成分,但正如上文所說,血清的批間差異大,更換血清時需要做大量的測試以取保替換的血清與原來的相似。而血清的供應也是必須要考慮的因素。由于氣候或瘋牛病的影響,說不定哪天血清就突然沒得賣了,那對實驗的影響可非同小可。另外,血清的價格也很昂貴,雖說現在也有便宜的國產血清,但是高品質的澳洲血清價格仍舊高起。因此,也有一些實驗室開始換用無血清培養基。
,細胞培養試劑*:
常備現貨液體培養基:
Hylone 雙抗 | SV30010 | 100ml | HAKATA 雙抗 | 15140-122 | 100ml | ||||
Hylone 胰酶 | SH30042.01 | 100ml | HAKATA 胰酶 | 25200-056 | 100ml | ||||
DMEM低糖 | SH30021.01 | 500ml | HAKATA 胰酶 | 25200-072 | 500ml | ||||
DMEM高糖(不含丙酮酸鈉) | SH30022.01 | 500ml | HAKATA B-27™ 添加劑 | 17504-044 | 10ml | ||||
DMEM/F12 1:1 | SH30023.01 | 500ml | HAKATA B-27™ 添加劑 | 12587-010 | 10ml | ||||
MEM/EBSS | SH30024.01 | 500ml | RPMI1640培養基 | 31800-022 | 10*1L | ||||
HAM'S/F12 | SH30026.01 | 500ml | DMEM培養基(高糖)含丙酮酸鈉 | 12800017 | 10*1L | ||||
IMDM | SH30228.01 | 500ml | DMEM培養基(高糖) 不含丙酮酸鈉 | 12100046 | 10*1L | ||||
DMEM高糖(含丙酮酸鈉) | SH30243.01 | 500ml | DMEM高糖培養基 | C11995500BT | 500ml | ||||
M199/EBSS | SH30253.01 | 500ml | DMEM低糖培養基 | C11885500BT | 500ml | ||||
PBS緩沖液 | SH30256.01 | 500ml | PBS | C10010500BT | 500ml | ||||
α-MEM | SH30265.01 | 500ml | 1640培養基 | C11875500BT | 500ml | ||||
改良型RPMI-1640 | SH30809.01 | 500ml | DMEM/F12 | C11330500BT | 500ml | ||||
Mv-4-11 | 人急性單核細胞白血病細胞 | MMQ | 大鼠垂體瘤細胞 | ||||||
RPMI 8226 | 人多發性骨髓瘤細胞 | GH3 | 大鼠垂體瘤細胞 | ||||||
NALM-6 | 人急性B淋巴白血病細胞 | 大鼠LSECs | 大鼠肝竇內皮細胞 | ||||||
Nthy-ori 3-1 | 人甲狀腺正常細胞 | MOLP-2 | 人多發性骨髓瘤細胞 | ||||||
FHC | 人正常結直腸粘膜細胞 | BTT739 | 小鼠膀胱移行細胞癌 | ||||||
FLS | 大鼠成纖維樣滑膜細胞 | A875 | 人黑色素瘤細胞 | ||||||
HFL | 人成纖維樣滑膜細胞 | SNU-761 | 人肝癌傳代細胞 | ||||||
HLEB3 | 人晶狀體上皮細胞系 | HPaSteC(HPSC) | 人胰腺星狀細胞 | ||||||
HN13 | 人口腔鱗狀細胞癌細胞 | BMDC | 小鼠樹突狀細胞 | ||||||
RLE-6TN | 大鼠肺上皮Ⅱ型細胞 | McCoy | 小鼠成纖維細胞 | ||||||
PA-TU-8988S | 人胰腺癌細胞 | SU86.86 | 人胰腺導管癌細胞 | ||||||
HEEC | 人正常食管上皮細胞 | KYSE140 | 人食管鱗癌細胞 | ||||||
MES-SA | 人子宮肉瘤細胞 | WSU-DLCL2 | 人彌漫大B淋巴瘤細胞 | ||||||
MCFs | 小鼠心肌成纖維細胞 | NCI-H596 | 人肺鱗癌細胞 | ||||||
EHEB | 人慢性B細胞白血病細胞 | CCD-19Lu | 人肺成纖維細胞 | ||||||
SNK6 | 人NK/T細胞淋巴瘤細胞 | HIMEC | 人腸微血管內皮細胞 | ||||||
PIG1 | 正常人皮膚黑色素細胞 | HDSMC | 人表皮血管平滑肌細胞 | ||||||
hTERT-RPE1 | 人視網膜色素上皮細胞 | EM-3 | 人髓系白血病細胞 | ||||||
ARPE-19/APRE-19 | 人視網膜色素上皮細胞 | KYSE50 | 低分化人食管鱗癌細胞 | ||||||
HO8910PM | 人卵巢癌細胞 | DSL-6A/C1 | 大鼠胰腺癌細胞 | ||||||
IPI-2I | 豬回腸上皮細胞 | PC14 | 人肺癌細胞 | ||||||
RT4-D6P2T | 大鼠神經雪旺氏細胞 | Capan-1 | 人胰腺管癌細胞 | ||||||
HUVEC | 人臍靜脈血管內皮細胞 | TEV-1 | 人滋養層細胞 | ||||||
HTR8-SVneo | 人絨毛膜滋養層細胞 | MZ-CRC-1 | 人髓樣甲狀腺癌細胞 | ||||||
KG-1a | 人急性骨髓白血病細胞 | HS27 | 人皮膚成纖維細胞 | ||||||
OCI-AML3 | 人急性髓細胞性白血病細胞 | H2.35 | 小鼠肝細胞 | ||||||
bEnd.3 | 小鼠腦微血管內皮細胞 | KMBC | 人膽管癌細胞 | ||||||
C4-2 | 人前列腺癌細胞 | KHYG-1 | 人NK細胞淋巴瘤細胞 | ||||||
C4-2B | 人前列腺癌細胞 | Nutu19 | 大鼠卵巢癌細胞 | ||||||
DOK | 人口腔黏膜癌前病變細胞 | KU-19-19 | 人膀胱癌細胞 | ||||||
SCC-15 | 人舌磷癌細胞 | HUH-1 | 人肝癌細胞 | ||||||
DT40 | 雞淋巴瘤細胞 | NCI-H1373 | 人肺腺癌細胞 | ||||||
RBE4 | 大鼠腦血管內皮細胞 | Colo357 | 人胰腺癌細胞 | ||||||
SCC-090 | 人口腔鱗癌細胞 | LSC-1 | 大鼠肝星形細胞 | ||||||
SCC-9 | 人舌鱗癌細胞 | CCC-HPF-1 | 人胚肺成纖維細胞 | ||||||
SCC-4 | 人舌鱗癌細胞 | HAPI | 大鼠小膠質細胞 | ||||||
SCC-25 | 人舌鱗癌細胞 | NCI-H322[H322] | 人非小細胞肺癌細胞 | ||||||
THLE-2 | SV40轉化人肝上皮細胞 | HT115 | 人結腸癌細胞 | ||||||
THLE-3 | SV40轉化人肝上皮細胞 | CCD-841 CoTr | 人結腸癌細胞 | ||||||
CAL-51 | 人乳腺癌細胞 | CNLMG-B5537SKIN | 人成纖維細胞 | ||||||
CAL-148 | 人乳腺癌細胞 | TMK-1 | 人胃癌細胞 | ||||||
ZYM-DIEC02 | 豬小腸上皮細胞 | GTL16 | 人胃癌細胞 | ||||||
G422 | 小鼠腦神經膠質母細胞 | SW954 | 人外陰鱗癌細胞 | ||||||
BMSC/hBMSCs | 人骨髓間充質干細胞 | HHL-5 | 人胚胎肝細胞 | ||||||
VCaP | 人前列腺癌細胞 | NHLF | 人正常肺成纖維細胞 | ||||||
VX2 | 兔間變表皮鱗癌瘤株 | MOLP-8 | 人多發性骨髓瘤細胞 | ||||||
CF-1 MEF | 小鼠胚胎成纖維細胞 | MCF-12F | 人乳腺上皮細胞 | ||||||
AR42J | 大鼠胰腺外分泌細胞 | NCI-H226 | 人肺鱗癌細胞 | ||||||
PMVEC | 大鼠肺微血管內皮細胞 | MCAEC | 小鼠冠狀動脈內皮細胞 | ||||||
GES-1 | 人胃粘膜細胞 | IAR20 | 大鼠肝細胞 | ||||||
Toledo | 人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞 | NCI-H2087 | 人非小細胞肺癌細胞 | ||||||
9L | 大鼠膠質瘤細胞 | MDA-PCA-2B | 人前列腺癌細胞 | ||||||
MLE-12 | 小鼠肺上皮細胞 | OCM-1A | 人脈絡膜黑色素瘤細胞 | ||||||
KBM5 | 人慢性髓白血病細胞 | SHP-77 | 人小細胞肺癌細胞 | ||||||
VSC4.1 | 脊髓前角運動神經元瘤細胞系 | MBMEC | 小鼠腦微血管內皮細胞 | ||||||
HIC | 人小腸癌細胞系 | DMS114 | 人小細胞肺癌細胞 | ||||||
LN-18 | 人神經膠質瘤細胞 | RCC4 | 人腎癌細胞 | ||||||
Kupffer | 肝枯否細胞 | HOMEC | 人卵巢微血管內皮細胞 | ||||||
SNU475 | 人肝癌細胞 | PZ-HPV-7 | 人前列腺上皮細胞 | ||||||
T98G | 人腦膠質細胞瘤細胞 | HECCL-1 | 人子宮內膜癌細胞 | ||||||
HMEC-1 | 人微血管內皮細胞株 | Rca-B | 大鼠鱗癌細胞 | ||||||
NCTC1469 | 小鼠正常肝細胞 | NCI-H1703 | 人肺鱗癌細胞 | ||||||
HIEC | 正常人腸上皮細胞 | LAPC4 | 人前列腺癌細胞 | ||||||
HPDE6-C7(H6C7) | 人正常胰腺導管上皮細胞 | hOMF | 正常人口腔粘膜成纖維細胞 | ||||||
RGC-5 | 小鼠視網膜神經節細胞 | CSQT-2 | 人肝癌細胞 | ||||||
hRMECs | 人視網膜微血管內皮細胞 | RMC | 大鼠腎系膜細胞 | ||||||
MN9D | 小鼠中腦多巴胺能神經元細胞 | HEC-251 | 人子宮內膜癌細胞 | ||||||
HCS-2/8 | 人軟骨肉瘤細胞 | JVM-3 | 人慢性髓白血病細胞 | ||||||
RTE | 大鼠氣管上皮細胞 | MM96L | 人黑色素瘤細胞 | ||||||
NCI-H1993 | 人肺腺癌細胞 | HHUA | 人子宮內膜癌細胞 | ||||||
MONOMAC6 | 急性單核細胞白血病細胞 | SAS | 人舌鱗癌細胞 | ||||||
SU-DHL-10 | 人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞 | HSAS1 | 人皮膚成纖維細胞 |